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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 质粒的试剂盒纯化问题
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gastrodia

金虫 (正式写手)
★
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比如Fermentas的GeneJET™ Plasmid Miniprep Kit，它是没有单独的去蛋白液，你最好把离心的时间加长到15min，这样沉淀就很充分，在取上清的时候就很方便了，如果取的时候带有极少量的白色沉淀，继续以下步骤也可以，对以后的实验影响也不是很大，如果取的时候带有较多的白色沉淀，还是从新离心或者使用酚氯仿抽提比较好
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11楼2009-08-16 20:58:45
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wulei0708

银虫 (小有名气)
★
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没有什么大碍的，我也碰到过这种情况，结果跑胶，智力还是比较纯的。离心时蛋白都虑掉了。
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12楼2009-08-16 21:21:12
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blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)
★
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用漂洗液多洗几次，不然的话可能会影响DNA回收率。
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jiayoubashaonian
13楼2009-08-16 22:33:44
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illcf_11

银虫 (初入文坛)
★
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如果比较难吸的话可以在离心10min的时候加大点转速，或延长离心时间。一般吸到一点点蛋白不要紧的
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14楼2009-08-17 20:20:15
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liluolove

★ ★
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houjinglhy(金币+1,VIP+0):谢谢 请问滤纸也能吸附DNA吗 还是你仅仅用滤纸过滤蛋白？ 8-20 23:10
我以前做也是老是离心不彻底，后来我师兄告诉我说可以将用过的过柱子的那个膜去掉，然后放片滤纸，这样过滤后很干净，我一直用这种方法，很好的。你不妨试试~
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15楼2009-08-20 11:14:55
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goodwish

木虫 (正式写手)

木虫书呆子
★
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以前我提质粒也经常那样，但似乎没什么问题~
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生命的海洋里，我是蓝色的一滴
16楼2009-08-20 14:11:06
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小瞥

铁虫 (小有名气)
★
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一般最好不要，沉淀多最终可能会有蛋白杂志污染，小提小量的试剂盒中没有过滤柱，直接加入吸附柱后须用去蛋白液去蛋白，这样可以减少蛋白杂质的最终残留
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17楼2009-08-21 11:37:51
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