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lucy200907

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[交流] 【讨论】高手进来看一下，这篇文章有没有问题

高手进来看一下，这篇文章有没有问题

重庆大学生物工程学院Yan Hu, Kaiyong Cai等发表在Biomaterials 30(2009)3626-3635的题为“ Surface mediated in situ differentiation of mesenchymal stme cells on gene-functionalized titanium films fabricated by layer-by-layer technique” 的论文有好多严重问题，高手进来看一下是不是。
作者把hBMP2克隆到pEGFP-c1载体上，但是根据他们给出的测序结果（论文中的图2）序列为 GCATGGACGAGCTGTACAAG TCC GGA CTC AGA TCT CGA GCT CAA GCT TGC ATG CCT GCA GGT CGA CTC TAG AGT CGA CCA TGG TGG CCG GGA CCC------ 我查了下相关的资料，质粒图库表明 pEGFP-c1表达GFP的最后六个碱基是TAC AAG. 基因库中 hBMP2 的序列是“ATGGTGGCCGGGACCC-----”。作者提供的测序结果咋一看是和基因库中的序列是一样的，但是实际上阅读框已经漂移了。作者提供的测序结果表达出来是“CCA TGG TGG CCG GGA CCC-----”, 而正确的hBMP2应该是 “ATG GTG GCC GGG ACC C-----” ，这样的话作者根本不可能得到pEGFP-hBMP2。而且，阅读框漂移后序列中出现终止密码 “TAG” 。所以想不通作者怎么可能得到EGFP fusion hBMP2蛋白，并根据这个得到后面的一系列的实验结果。作假？
此外他们构建pEGFP-hBMP2的过程也很怪异，从pCDNA3.1-hBMP2上单酶切，连在puc19上，再双酶切连在pEGFP上。但是测序结果里的序列看起来并不符合这个过程，莫名奇妙地多了sal位点。
高手点评一下，我的看法对吗？

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