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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 毕赤酵母表达（总是整合不上）
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yuweibest

木虫 (正式写手)

[交流] 毕赤酵母表达（总是整合不上）已有7人参与

我正在做毕赤酵母表达，前面的一些步骤应该没什么问题。重组质粒已经构建好，就是在重组质粒线性化并且电转化毕赤酵母时，在相应的抗性平板上总是张不出菌落！！。也就是线性整合不上去。
  请问哪位大侠做过这方面，给点提高转化率的建议和改进步骤。
   我用的PgapzαA载体，目的片段为2.9KB（比较大）

[ Last edited by silicare on 2011-5-19 at 21:22 ]
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1楼2009-08-13 17:31:14
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hulanzi

新虫 (初入文坛)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
silicare(金币+10): 第一天注册，鼓励交流，欢迎常来生物综合版 2011-05-19 21:49:27
注意调整酵母感受态细胞浓度，和线性质粒的浓度，这个对转化也很关键
赞一下(2人) 回复此楼
15楼2011-05-19 19:09:45
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