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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 双酶切获得目的片段
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spiderboy

金虫 (正式写手)
★
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楼主，你有目的片段的序列吧？有的话根本不需要什么分析软件，直接在序列里搜索下酶切位点就好了。。。如果你没有目的序列，那长度总该知道吧，可以用那两种酶适切下，看下结果就知道了。。。那两个酶还是可以一起切的，我经常做这个。。
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11楼2009-08-08 14:51:54
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蓝皮鼠7983
12楼2009-08-08 16:58:16
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smallcat227

木虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by greatsaint at 2009-8-7 08:26:



我用的是克隆试剂盒，两侧的MCS都是知道的，有我上面说的那两个酶切位点。只是我现在怕目的片段中也有这两个酶的作用位点，若是这样再用此双酶切的话就得不到目的片段了。你说的有道理，可以在设计引物时加 ...

不麻烦啊，直接在5‘端加酶切位点和2-3个保护碱基就可以，非常常用的方法
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13楼2009-08-09 18:14:58
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wulei0708

银虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+2,VIP+0):欢迎发帖交流~！ 8-9 21:44
如果你有目的片段的序列,你可以用NTI看看,基因里面有没有这俩个酶切位点.另外,要看你的这两个美是不是一个公司的,在同一个BUFFER中的活性怎么样,温度一样不.我一般都是在一起切,效果还不错.你可以试一试.
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14楼2009-08-09 21:41:42
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银杏下

金虫 (小有名气)
最土的方法，把序列放在word上，再ctrl+F，比如要找XhoI搜下CTCGAG，就可以了
当然用软件是最好的了
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15楼2009-08-09 22:57:02
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greatsun

木虫 (正式写手)
★
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在设计引物时加上酶切位点，不麻烦！！
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16楼2009-08-09 23:01:11
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