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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 求助液相压力3500以上，峰型不对称，解决办法？
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tangbaicai

新虫 (小有名气)

[交流] 求助液相压力3500以上，峰型不对称，解决办法？

新手做高压液相色谱，做虎杖苷标准曲线，甲醇：水=45：55（流动相），流动相溶解样品，样品浓度是100ug/ml，进样10ul,
       用的是新柱子，用前纯甲醇冲洗过，压力3500以上，峰型上尖下宽，且不对称。请问怎么办？可能哪里出了问题？如果柱子堵了怎么办？（不想换新柱）十分谢谢了。

[ Last edited by tangbaicai on 2009-8-5 at 17:22 ]
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我们会不会相忘于江湖？
1楼 2009-08-05 17:11:07
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kendon

木虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
karl2100(金币+1,VIP+0):多谢指教！ 8-23 18:35
1、先判断是否是色谱柱堵了？将柱子卸下，看看柱前压是多少？你的柱压好象有点高啊！！
2.重色谱柱，先用10%甲醇冲洗几个小时，再用90%甲醇冲洗几个小时，最后用纯甲醇冲洗试试。
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16楼2009-08-23 15:08:26
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tjegg

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★
tangbaicai(金币+1):谢谢参与
tangbaicai(金币+1,VIP+0): 8-5 17:22
可能柱子有些堵，听你的描述，峰有拖尾现象，可以在缓冲液 中加点三乙胺，就不拖了。
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除了你的亲人，没有人应该对你好，对你好的人，一定要珍惜。
2楼2009-08-05 17:16:32
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tangbaicai

新虫 (小有名气)
加多少三乙胺？浓度是多少？加在甲醇里还是纯水里，我用的是双泵。
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我们会不会相忘于江湖？
3楼2009-08-05 17:24:46
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algerho

金虫 (小有名气)
★
tangbaicai(金币+1):谢谢参与
1 是否你的柱子是新的，填料密，导致压力高，担心压力高就改用乙腈-水作为流动相
2 如果是柱子有点堵，就用低流速冲洗
3 峰形的问题，可以改变流动相的比例以及类型，调节柱温。
三乙胺加在水里，你加碱要注意pH，比例要查一下
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4楼2009-08-05 17:51:14
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