24小时热门版块排行榜    

查看: 1728  |  回复: 18
当前主题已经存档。

chemosensor

金虫 (小有名气)

recomend a willey book?

引用回帖:
Originally posted by cnmaomao at 2005-12-1 06:44 PM:
最近做荧光发射光谱,发现当用254nm做激发波长时获得的荧光发射光谱竟然在254nm附近有发射峰,请教这是为什么?

Molecular fluorescence
sensor
11楼2006-01-12 13:09:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lwx20212

金虫 (小有名气)


huyuchem(金币+1):鼓励
在做荧光光谱时,在激发波长和激发波长整数倍的地方都会有瑞利散射,在激发波长几个纳米后还会有一个较弱的拉曼散射峰。判断的方法是改变激发光波长,两个散射峰会随着激发光波长的改变而改变,你真正的荧光峰只会发生强度的改变,峰位置不会有改变。
12楼2006-01-13 09:21:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

soaring0331

金虫 (正式写手)

纠正错误


huyuchem(金币+1):早该出手嘛!呵呵。谢谢!
引用回帖:
Originally posted by sangdy at 2006-1-12 00:14:
一般激发波长要比发射波长小5-10nm为宜。有人扫荧光发射时刚好相反,激发选250nm,却从220nm开始扫起,导致仪器总是出错,显示什么overflow。荧光物质的吸收峰和荧光发射峰之间是有些差别的,这个差别叫 stoke s ...

并不是激发波长要比发射波长小多少。当然激发波长肯定是比发射波长小的。
通过荧光物质已知的发射峰,扫描它的激发光谱,可以得到最大激发波长。
然后以它的最大激发波长,扫描它的荧光发射光谱,这样荧光才最强。

Stokes shift 是 激发峰 与 发射峰 之间的距离,即最大激发波长与最大发射波长之间的波长差。Stokes shift 越大,瑞利效应越小。荧光物质的激发峰一般情况下在吸收峰附近。

[ Last edited by soaring0331 on 2006-1-13 at 22:43 ]
13楼2006-01-13 22:32:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

soaring0331

金虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by lwx20212 at 2006-1-13 09:21:
在做荧光光谱时,在激发波长和激发波长整数倍的地方都会有瑞利散射,在激发波长几个纳米后还会有一个较弱的拉曼散射峰。判断的方法是改变激发光波长,两个散射峰会随着激发光波长的改变而改变,你真正的荧光峰只会 ...

说的很好,这是所谓的倍频和半频瑞利散射效应。

那个拉曼散射峰是水的拉曼峰

[ Last edited by soaring0331 on 2006-1-13 at 22:48 ]
14楼2006-01-13 22:47:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sangdy

木虫 (著名写手)

对“纠正错误”的错误的纠正

引用回帖:
纠正错误
并不是激发波长要比发射波长小多少。当然激发波长肯定是比发射波长小的。
通过荧光物质已知的发射峰,扫描它的激发光谱,可以得到最大激发波长。
然后以它的最大激发波长,扫描它的荧光发射光谱,这样荧光才最强。

Stokes shift 是 激发峰 与 发射峰 之间的距离,即最大激发波长与最大发射波长之间的波长差。Stokes shift 越大,瑞利效应越小。荧光物质的激发峰一般情况下在吸收峰附近。
[ Last edited by soaring0331 on 2006-1-13 at 22:43 ]

引用回帖:
Originally posted by sangdy at 2006-1-12 00:14:
一般激发波长要比发射波长小5-10nm为宜。有人扫荧光发射时刚好相反,激发选250nm,却从220nm开始扫起,导致仪器总是出错,显示什么overflow。荧光物质的吸收峰和荧光发射峰之间是有些差别的,这个差别叫 stoke s ...  

我这里分明说的是荧光发射的扫描范围,强调的是发射要从比激发波长大5-10nm的波段扫起。需要补充的是扫描范围最大也就是激发波长的二倍足以。个人不认为有什么错误,而且也是对楼主问题的恰当回复。

至于激发波长怎么选,荧光发射波长是多少,上面的“纠正错误”到是存在严重错误,有必要再纠正。

荧光激发波长的选择,原则上说应该以紫外吸收峰为准。即在测荧光之前,须先做一些准备工作。在实际的选择上,在避开各种背景噪音的情况下,宜选取波长较长能量较低的光进行荧光激发。这一点必须着重强调!换句话说,最大激发波长一般是不用的,大多也在205-220nm之间,因为:这个波长的光能量太高,对反射镜(光源后面的那个镜子)和激发光栅、发射光栅以及后面的光电倍增管都是严重的摧残和虐待!

此外还需要强调的是,在测荧光的时候,光源要不停开关的,所以在测的间隙建议随手关灯,以尽可能延长光源的寿命(一般是200-500h)。
15楼2006-03-03 14:53:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sangdy

木虫 (著名写手)

荧光强不一定是好事,我经常为荧光太强,超出测量的极限而头痛,往往意味着必须改光栅狭缝的大小,或者调节入射光的通量。如果是荧光物质本身的荧光效率很低,那根本就不用测荧光,因为影响荧光发射强度的因素太多了,什么都对它造成干扰。另外soaring0331知不知道荧光是没有单位的?它的强度只有相对的意义。
16楼2006-03-03 15:00:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sangdy

木虫 (著名写手)

引用回帖:
Originally posted by soaring0331 at 2006-1-13 22:32:
通过荧光物质已知的发射峰,扫描它的激发光谱,可以得到最大激发波长。
然后以它的最大激发波长,扫描它的荧光发射光谱,这样荧光才最强……

至少我是不允许我们实验室的仪器被人这样折磨的,呵呵


[ Last edited by sangdy on 2006-3-3 at 15:11 ]
17楼2006-03-03 15:02:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zwc021

银虫 (小有名气)

我想请问一下,荧光、同步荧光、共振光散射有什么不一样啊 。。。急啊。。
拜托咯!!
18楼2006-06-06 20:26:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gxr1320

金虫 (小有名气)

大家说得真好,我有个问题,我做的样品在紫外灯下照的时候是发红光的,但是用荧光分光光度仪测时,却在523nm处有一个很强的峰,扫描了两次都是这样;
还有我用260nm激发时,扫描时从哪个波段开始呢,我初学光学方面的知识。不太懂,想请大家帮我解答一下。谢谢!
19楼2006-06-06 21:57:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 cnmaomao 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
信息提示
请填处理意见