土壤DNA提取后的PCR问题 - 生物科学 - 第2页小木虫论坛-学术科研互动平台

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macyang21

木虫 (小有名气)

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我的qq号是176654387，电邮是luckilylq@yahoo.com.cn,我也是做土壤的，交流下

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希望大家可以互相交流

11楼2009-07-24 16:20:53

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cll1024

银虫 (小有名气)

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现在上海生工的柱式土壤DNA提取试剂盒，能够去除腐殖酸，效果很不错，你们可以要试用装试试的

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12楼2009-07-24 16:46:03

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gfxmu

新虫 (初入文坛)

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很可能是杂质影响了PCR，你可以试一下稀释模板浓度。

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13楼2009-07-24 16:55:38

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hongrunge

铁杆木虫 (小有名气)

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DNA提取的质量很重要，腐殖质、色素太多的话对PCR影响很大

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14楼2009-07-24 22:35:15

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speculiar

银虫 (小有名气)

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土壤DNA的问题

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15楼2009-07-24 23:43:15

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yuanbo934

至尊木虫 (著名写手)

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Mg2+是加到PCR buffer里面的那种的Mg2+终浓度一般为1.5mM，可以最高调到2.5mM也许会有效果。我一般用2.0mM扩增。

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16楼2009-07-26 10:05:17

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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

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o(∩_∩)o...,不妨采用下touchdown试试,我曾经用这个方法扩增出来了.

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The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.

17楼2009-07-26 14:04:25

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yxx41

金虫 (小有名气)

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Originally posted by macyang21 at 2009-7-24 16:15:
我也是做土壤的，我觉得做土壤PCR做不出结果，还是DNA的原因！就算做出来了，重复性也是很差！我觉得最笨的办法就是不断的稀释DNA，浓度梯度PCR！

受教了，我以前也试过稀释DNA的，效果不是很好啊……

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内事不决问百度，外事不决问Google，横批：wikipedia

18楼2009-07-29 09:43:39

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yxx41

金虫 (小有名气)

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专业: 微生物资源与分类学

引用回帖:

Originally posted by cll1024 at 2009-7-24 16:46:
现在上海生工的柱式土壤DNA提取试剂盒，能够去除腐殖酸，效果很不错，你们可以要试用装试试的

还是手提试试吧，全当练手啊

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内事不决问百度，外事不决问Google，横批：wikipedia

19楼2009-07-29 09:44:42

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liuzhenhua

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小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流

切胶纯化！一般没有问题！我们一直这样做！

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20楼2009-08-06 09:15:08

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