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wangshilu

木虫 (正式写手)

[交流] 请问这张酶切图怎么分析

请问各位高手,以下图片中第2、3、4道分别是质粒(试剂盒提取的)酶双切、单酶切、单酶切的效果,不知道问题出在哪?谢谢!
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shensc727

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
1、上样量太大,建议稀释后再检测
2、你为什么用80度灭活?上样buffer的一个功能就是酶灭活。
3、37度酶切不会使质粒讲解
4、建议酶切时间不要太长,太长会出现star活性,影响酶切效果
5、提取质粒有问题。你所提的质粒是左数第一个亮带吧?大部分都是刚刚出孔,你的质粒很大吗?多大?质粒提好了,一般都是2~3条带,是一种质粒的三种不同构象。建议重提质粒。
12楼2009-07-24 09:43:36
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anik

银虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
DNA 量过多
酶切不彻底
DNA降解
2楼2009-07-23 11:58:16
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wangshilu

木虫 (正式写手)

质粒检测结果还是很好的,是酶切时间的问题吗?
3楼2009-07-23 12:04:08
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houjinglhy

荣誉版主 (文坛精英)

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小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
上样量太大 这个胶跑的尴尬  嘿嘿
而且胶放反了 也不知道2,3,4道是哪个
从小就学习鲁迅,直到现在才体会到他当时是多么的绝望和无助,却仍要用尽最后一丝力气声嘶力竭的呐喊!
4楼2009-07-23 12:15:49
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