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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 【求助】为什么走线性梯度pH3-2（10min）中间不出峰？
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深蓝2895

木虫 (职业作家)
★ ★
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chiraler(金币+1,VIP+0):谢谢参与 7-23 19:57
我觉得这样的实验方法是有缺陷的
因为PH3和PH2的两种溶液按照你的方法在液相里混和,然后做出来的图谱
又能说明什么问题呢?
因为你的缓冲液的PH随着时间的改变,所以在你PH改变的10分钟内,你每个时间出来的色谱峰多是在不同的PH的缓冲液也就是不同的流动相组成做出来,保留时间 峰形多不会不一样
那你又拿什么做比较呢?有可比性吗???
你是要想知道在PH3到PH2之间哪个PH适合你的样品,也就是说你想要在合理的PH值下得到更好看的色谱图吧!!
我建议你准备至少3-5个不同PH值的缓冲液
在同一仪器其他所有的条件不变 只改变缓冲液
然后得到3-5张不同的图谱  
你就可以进行比较了
择优而定!
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我们应该好好活着，因为我们会死很久滴！
11楼2009-07-23 19:22:06
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深蓝2895

木虫 (职业作家)
试问楼主做了多长时间HPLC了?
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我们应该好好活着，因为我们会死很久滴！
12楼2009-07-23 19:24:25
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weipingwu

金虫 (正式写手)
★
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呵呵呵，pH梯度对我来说是一个新生的概念，但是没法在液相中使用，楼主的创新精神值得鼓励！但是建议楼主好好学习色谱基础理论，合理地提出创新意见！
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不经历风雨，怎能见彩虹？
13楼2009-07-24 07:41:31
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yix1994

★
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根据出峰时间确定起始和最终有机相的比例！
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14楼2009-07-26 09:59:40
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jiamingw

金虫 (小有名气)
★
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pH梯度对我来说是一个新生的概念
晕，第一次听说这个概念，一般来说做的最多的是有机溶剂梯度，选一个ph，做梯度洗脱就可以了，有什么必要做pH梯度？
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15楼2009-07-27 10:11:11
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ljh616528

金虫 (正式写手)
★
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第一次听说pH梯度，以前都是配制一系列不同的pH值的缓冲液，在某个pH再改变其他条件摸索液相条件。pH值对物质的解离状态影响很大，你试验的目的是什么呢？检测？制备？
还有想问下，你怎么保证是线性的梯度？一般pH的变化都不是线性的，并且还是缓冲液
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平安是福
16楼2009-07-27 11:15:03
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