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jianwu118

至尊木虫 (著名写手)

[交流] 求助:研究槲皮素对肝癌HepG2细胞的作用的实验

各位虫友:我现在正在做槲皮素对肝癌HepG2细胞的作用的药理试验,就文献而言,这个实验应该不是很难,就相当于一个MTT实验;但我做了近两个月还没出结果,心里很着急---     起初预实验的时候还是很顺利的  设计了几个浓度梯度  
40μmolL就是最大给药量 此时的细胞存活率大概在50%   但在进行正式实验时
72小时给药组的细胞莫名其妙的大量死亡 培养基也变得混浊  同时似乎还闻到一股甜腻的香气  于是怀疑是药物有污染(未给药组的是正常的)药物和DMSO是sigma的 而且还过滤除菌 加抗生素 但这些都没用 其后我怕细胞有问题 又换了一处来源的HepG2细胞  但结果依旧  这实验都快把我逼疯了    请大家帮忙支支招  在下感激不尽  谢谢!
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lanwoco

铜虫 (小有名气)

可能没有什么有价值的专业意见,仅仅谈谈看法吧!

★ ★
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karl2100(金币+1,VIP+0):多谢指教! 7-22 21:22
首先如同你做的一样,需要排除污染的问题,最好的办法是逐一筛查可能引入污染的环节(很多,一一筛查工作量很大)。当然,还得排除实验环境与操作人员的环节(实验室其它的类似实验有没有出现奇怪的现象呢?)。最好的办法就是请其它实验室的人员重复此实验。
另外,有没有可能是病毒污染呢?
2楼2009-07-22 12:32:16
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lwjxz

木虫之王 (知名作家)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
多查查资料,这方面的资料很多,槲皮素对人肝癌HepG2细胞的作用与机制,链接:http://scholar.ilib.cn/A-QCode~zxyjhgbzz200301008.html
3楼2009-07-22 13:10:11
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dxdtq

金虫 (正式写手)

注意环境的污染 以及人的污染吧
4楼2009-07-22 20:37:37
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jianwu118

至尊木虫 (著名写手)

应该不会是操作污染 未给药组的都没问题 只有加了要的才有问题 而药物都是过滤除菌过的 真的是找不到原因啦  
5楼2009-07-23 10:37:20
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muyi763

银虫 (小有名气)


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变浑应该是染菌了或细胞自溶,“甜腻的香气”很象DMSO溶解细胞后的味道
6楼2009-07-23 18:04:17
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tjegg

铁杆木虫 (著名写手)


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引用回帖:
Originally posted by muyi763 at 2009-7-23 18:04:
变浑应该是染菌了或细胞自溶,“甜腻的香气”很象DMSO溶解细胞后的味道

同意,DMSO浓度太高了,我的经验不要超过0.5%。
除了你的亲人,没有人应该对你好,对你好的人,一定要珍惜。
7楼2009-07-25 12:45:44
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jianwu118

至尊木虫 (著名写手)

是这个原因吗?  谢谢前面两位的指点  我再试试看 谢谢
8楼2009-07-25 20:44:22
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willowvivi

铜虫 (小有名气)


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设计了DMSO的对照吗,只加入DMSO不加入槲皮素样品的,细胞是什么状况?
9楼2009-08-05 17:45:16
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jianwu118

至尊木虫 (著名写手)

引用回帖:
Originally posted by willowvivi at 2009-8-5 17:45:
设计了DMSO的对照吗,只加入DMSO不加入槲皮素样品的,细胞是什么状况?

这个时候  细胞是正常生长的  所以很奇怪---
10楼2009-08-07 21:14:56
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