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michaelwuqingyu

金虫 (正式写手)

[交流] 关于体外合成蛋白求助

我有个问题想请教大家,体外合成蛋白我看有人用 PROMEGA 的TnT-coupled wheat germ cell-free system。 但是这个体系需要加S35,我想避开同位素的方法,有没有其他试剂盒能够代替它,而且效果比较好。另外,我是不是可以在我DNA模版上直接加尾巴,这样也能纯化出我所需要的蛋白?有人这么做过么?多谢

[ Last edited by michaelwuqingyu on 2009-7-14 at 11:01 ]
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

1、连到载体再测序效果会好很多
2、在引物加尾巴即可,DNA模板怎么加尾巴呢……
2楼2009-07-14 10:34:25
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w19840308

我觉得还决定于你体外表达的蛋白做什么用?
3楼2009-07-14 21:12:35
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michaelwuqingyu

金虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by w19840308 at 2009-7-14 21:12:
我觉得还决定于你体外表达的蛋白做什么用?

简单的说,就是跑出条带看大小,看看翻译起始点。
4楼2009-07-14 22:35:32
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