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膜蛋白提取的问题
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最近在提膜蛋白做Western,可是总是提不出来，我的目的蛋白是七次跨膜的，查了好多方法，结果都不理想。 请高人指点一下！ |
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wy8703(金币+1,VIP+0): 7-12 18:12
wy8703(金币+1,VIP+0): 7-12 18:12
| 你可以试试试剂盒，个人觉得ProteoExtract跨膜蛋白抽提试剂盒不错，它能够非常有效地抽提膜蛋白。其温和的非去污剂设计使抽提产物适用于各种蛋白质组研究方法，包括酶活分析（如激酶活性检测），非变性胶电泳，1D和2D SDS-PAGE，western blot以及ELISA等。1D或2DGE后，样品经胰酶消化可以做MS分析。此外，可以按起始材料按比例放大或减少试剂用量，以及可优化选择试剂配方的抽提操作，又进一步提高了这个试剂盒获取完整膜蛋白和生物条件下的膜关联蛋白的效果。ProteoExtract跨膜蛋白抽提试剂盒重现性极好，易与下游实验配套。与其它方法不同，这个方法不需要超声，长时间高强度涡旋，超速离心和高温孵育等破坏蛋白的处理，从而使蛋白的降解和次级修饰的风险降到最低。 |
2楼2009-07-11 21:59:34
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3楼2009-07-11 22:00:30
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8楼2009-07-12 23:45:36