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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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liu33feng

[交流] 请大家指点，要做液质，第一次做，大家给点建议。 已有1人参与

是个未知物质 跑板氯仿甲醇8：1  有两个点，还是比较开的，然后想做下液质。可惜以前没做过，问下：
做液质样品浓度大概有什么要求  
如果是反相柱的话 ，流动相是怎么选择的了。
新人，大家多多指教和批评。
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1楼 2009-07-08 16:41:12
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cucupig

银虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
xy4585618(金币+2,VIP+0):3q 7-9 15:04
做质谱最好不要用三乙胺，会显著降低灵敏度，而且系统残留非常严重。
如果做正离子，流动相里加一点有机酸，如甲酸，醋酸比较好，提高质子化；
如果做负离子，流动相里加一点碱，如氨水比较好。
不管做正离子还是负离子，有机相比例高都会有利于离子化效率的。
如果反相色谱上等度洗脱你的物质保留比较弱可以试试梯度洗脱。如果很弱，可以试试胺基柱或腈基柱。
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8楼2009-07-09 14:57:35
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awu3pand

金虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
xy4585618(金币+1,VIP+0):3q 7-9 15:02
有机相至少10%，如果有三乙胺等胺类的最好多跑跑基线~16~24h吧，一定要防止盐析出来损伤泵里的宝石杆！
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2楼2009-07-08 16:48:50
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awu3pand

金虫 (小有名气)
★
karl2100(金币+1,VIP+0):多谢指教！ 7-9 00:56
是个未知物质 跑板氯仿甲醇8：1  有两个点，还是比较开的，然后想做下液质。可惜以前没做过，问下：
做液质样品浓度大概有什么要求  
如果是反相柱的话 ，流动相是怎么选择的了。
新人，大家多多指教和批评。

流动相就调甲醇和氯仿比例好了，出峰时间不能太长，但是又要保证杂质峰和主峰的分离度在1.5以上，个人觉得分离度在2.5以上积分比较准~
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3楼2009-07-08 16:50:59
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pal2004

木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
karl2100(金币+1,VIP+0):多谢提供！ 7-8 21:32
有几点要注意的，供楼主参考
1. 液质因为气化和离子化的问题，你做HPLC时的流速不一定能直接用到LC/MS上，比如常规ESI，要根据离子源的要求，让进入质谱的流速达到满意的范围。一般LC/MS都比较小。
2. 流动相里有些试剂是不能加的，比如三氟乙酸，尽管TFA可以改善保留和峰型，但会淬灭离子信号，所以一般LC/MS不能使用。
还有磷酸盐及其他不挥发缓冲盐在离子源会沉淀并堵塞毛细管，所以也不能用。而且缓冲盐也会导致离子抑制，因此流动相的离子强度不要太大。
去污剂、表面活性剂也有离子抑制现象发生，而且表面活性剂产生的加合物会干扰质谱数据。
总之，HPLC时就应该按照LC/MS的要求摸好条件，否则上了液质还有从头摸条件，费时费力。
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4楼2009-07-08 18:28:33
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