24小时热门版块排行榜    

查看: 655  |  回复: 4
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

joo

金虫 (正式写手)

[交流] 用磷酸化抗体检测目的蛋白磷酸化的程度实验步骤?

用磷酸化抗体检测目的蛋白磷酸化的程度实验步骤?

先用磷酸化抗体,striping,再用非磷酸化抗体?

还是把抗体颠倒过来使用?

已经在其他板块发帖求助,欢迎参与讨论,先谢谢了!

http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=1408545

[ Last edited by 350784478 on 2009-7-1 at 15:56 ]
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

joo

金虫 (正式写手)

谢谢 三磷酸腺苷 参与讨论。

可是也有人说 要先测总的,再测磷酸化的,这个我就不太懂了,他们之间的检测结果会有差别吗?
3楼2009-07-01 10:21:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
自然是先磷酸化抗体,曝了之后洗,然后再孵总抗体
应“从少到多”
2楼2009-07-01 09:40:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
350784478(金币+1,VIP+0):感谢参与 7-1 15:55
本来wb这种半定量的就已经很那个了
因为洗膜不一定能够把一抗二抗全部给洗掉,因此先孵总的,再洗,怎么样都会有残留,无论从抗原抗体结合的角度上看,还是从最后发光上看,总会有残留
这样就会影响磷酸化抗体的结合
如果先孵磷酸化的,结合得少,洗的话也能相对洗得更加干净
然后再孵总的,反正是总的,就算原来有残留的磷酸化一抗结合,那么不惧了
4楼2009-07-01 10:48:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

joo

金虫 (正式写手)

谢谢 三磷酸腺苷 的分析,解释。

在我们的实验中也是先用磷酸化的抗体,洗膜,再测总的。

可是有个审稿人的意见却说是应先做总的,再做磷酸化的。

看来这个问题可以和他理论一下了。

弱弱地问一句有人遇到和我们一样的审稿意见吗?
引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2009-7-1 10:48:
本来wb这种半定量的就已经很那个了
因为洗膜不一定能够把一抗二抗全部给洗掉,因此先孵总的,再洗,怎么样都会有残留,无论从抗原抗体结合的角度上看,还是从最后发光上看,总会有残留
这样就会影响磷酸化抗体的 ...

5楼2009-07-01 11:06:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +11 家与远方 2026-08-10 16/800 2026-08-16 10:28 by ray43
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +12 archvillain 2026-08-15 23/1150 2026-08-15 20:47 by foyo404
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +6 wangze12014 2026-08-14 7/350 2026-08-15 20:12 by gltch
[基金申请] filecode +8 cratir 2026-08-14 12/600 2026-08-15 18:08 by zyfgau
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的,真有人买论文么?感觉没必要啊 +12 Tide man 2026-08-10 13/650 2026-08-15 16:34 by 氺木
[基金申请] 各位道友,我要去昆明玩几天,回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[基金申请] 奇怪,两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +8 布布和一二 2026-08-10 11/550 2026-08-14 14:58 by Equinoxhua
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +23 Lanmanbaby 2026-08-09 37/1850 2026-08-14 13:40 by Equinoxhua
[硕博家园] 请教兼职经验 +3 是阿文鸭 2026-08-09 3/150 2026-08-14 12:07 by HER12025
[基金申请] filecode +15 documentary 2026-08-10 17/850 2026-08-14 10:08 by kissu88
[基金申请] 静等基金结果 +8 gjjjzhong 2026-08-10 21/1050 2026-08-13 17:56 by 且听虎啸
[基金申请] 重要来源:本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] Filecode 又变了,巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 结合人工智能,周易传统文化,filecode打分制来了,3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
信息提示
请填处理意见