应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 用磷酸化抗体检测目的蛋白磷酸化的程度实验步骤?
51/1返回列表
查看: 597  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

joo

金虫 (正式写手)

[交流] 用磷酸化抗体检测目的蛋白磷酸化的程度实验步骤?

用磷酸化抗体检测目的蛋白磷酸化的程度实验步骤?

先用磷酸化抗体,striping,再用非磷酸化抗体？

还是把抗体颠倒过来使用？

已经在其他板块发帖求助，欢迎参与讨论，先谢谢了！

http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=1408545

[ Last edited by 350784478 on 2009-7-1 at 15:56 ]
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2009-07-01 09:28:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
自然是先磷酸化抗体，曝了之后洗，然后再孵总抗体
应“从少到多”
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2009-07-01 09:40:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

joo

金虫 (正式写手)
谢谢 三磷酸腺苷 参与讨论。

可是也有人说 要先测总的，再测磷酸化的，这个我就不太懂了,他们之间的检测结果会有差别吗？
赞一下 回复此楼
3楼2009-07-01 10:21:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
350784478(金币+1,VIP+0):感谢参与 7-1 15:55
本来wb这种半定量的就已经很那个了
因为洗膜不一定能够把一抗二抗全部给洗掉，因此先孵总的，再洗，怎么样都会有残留，无论从抗原抗体结合的角度上看，还是从最后发光上看，总会有残留
这样就会影响磷酸化抗体的结合
如果先孵磷酸化的，结合得少，洗的话也能相对洗得更加干净
然后再孵总的，反正是总的，就算原来有残留的磷酸化一抗结合，那么不惧了
赞一下(11人) 回复此楼
4楼2009-07-01 10:48:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

joo

金虫 (正式写手)
谢谢 三磷酸腺苷 的分析，解释。

在我们的实验中也是先用磷酸化的抗体，洗膜，再测总的。

可是有个审稿人的意见却说是应先做总的，再做磷酸化的。

看来这个问题可以和他理论一下了。

弱弱地问一句有人遇到和我们一样的审稿意见吗？
引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2009-7-1 10:48:
本来wb这种半定量的就已经很那个了
因为洗膜不一定能够把一抗二抗全部给洗掉，因此先孵总的，再洗，怎么样都会有残留，无论从抗原抗体结合的角度上看，还是从最后发光上看，总会有残留
这样就会影响磷酸化抗体的 ...

赞一下 回复此楼
5楼2009-07-01 11:06:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 joo 的主题更新
51/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 生物学学硕求调剂 +7 小羊睡着了? 2026-03-23 10/500 2026-03-25 02:24 by 清风拂扬。 m
[考研] 材料学求调剂 +6 Stella_Yao 2026-03-20 6/300 2026-03-25 00:37 by baoball
[考研] 07化学280分求调剂 +6 722865 2026-03-23 6/300 2026-03-24 20:58 by allen-yin
[考研] 材料专硕找调剂 +5 哈哈哈吼吼吼哈 2026-03-23 5/250 2026-03-24 19:07 by 了了了了。。
[考研] 一志愿南航材料专317分求调剂 +5 炸呀炸呀炸薯条 2026-03-23 5/250 2026-03-24 16:52 by 星空星月
[考研] 300求调剂，材料科学英一数二 +5 leaflight 2026-03-24 5/250 2026-03-24 16:25 by laoshidan
[考博] 26申博自荐 +3 whh869393 2026-03-24 3/150 2026-03-24 09:55 by 21018060
[考研] 材料/农业专业，07/08开头均可，过线就行 +3 呵唔哦豁 2026-03-23 4/200 2026-03-23 22:30 by 汪！？！
[考研] 工科0856求调剂 +5 沐析汀汀 2026-03-21 5/250 2026-03-23 17:56 by 海瑟薇-
[考研] 328求调剂 +4 LHHL66 2026-03-23 4/200 2026-03-23 14:55 by lbsjt
[考研] 石河子大学（211、双一流）硕博研究生长期招生公告 +3 李子目 2026-03-22 3/150 2026-03-22 21:01 by 怎么释怀
[考研] 一志愿西安交通大学材料工程专业 282分求调剂 +11 枫桥ZL 2026-03-18 13/650 2026-03-22 20:26 by edmund7
[考研] 一志愿 西北大学 ，070300化学学硕，总分287，双非一本，求调剂。 +3 晨昏线与星海 2026-03-20 3/150 2026-03-22 16:00 by ColorlessPI
[考研] 354求调剂 +7 Tyoumou 2026-03-18 10/500 2026-03-22 11:11 by 人来盛
[考研] 材料学硕301分求调剂 +7 Liyouyumairs 2026-03-21 7/350 2026-03-21 22:31 by peike
[考研] 化学调剂 +5 yzysaa 2026-03-21 5/250 2026-03-21 22:12 by peike
[考研] 材料 271求调剂 +5 展信悦_ 2026-03-21 5/250 2026-03-21 17:29 by 学员8dgXkO
[考研] 085601调剂 358分 +3 zzzzggh 2026-03-20 4/200 2026-03-21 10:21 by luoyongfeng
[考研] 一志愿华南师大 070300（化学）304分求调剂 +3 0703武芊慧雪304 2026-03-18 3/150 2026-03-21 00:48 by JourneyLucky
[考研] 一志愿南昌大学，327分，材料与化工085600 +9 Ncdx123456 2026-03-19 9/450 2026-03-20 23:41 by lovewei0727
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭