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请教药动实验全血处理
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请教药动实验全血处理 最近要作药动实验，测定血药浓度需要用全血，请教大家几个问题 全血样品怎么保存？能-20冷冻吗？ 文献上说用EDTA抗凝，请问具体怎么操作 |
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Collect the blood (∼250 μl) drop-wise into a microcentrifuge tube containing 25 μl of 15% tripotassium EDTA in PBS. 以上是CURRENT PROTOCOL IN PHARMACOLOGY中的一种方法。 网上查到的一个记录：EDTA-K2， 1.5～2.2mg（干粉）抗凝1ml血 抗凝的全血用于血药浓度分析，可以冷冻。因为我们需要测定的是全血中的药物总浓度，在样品处理时肯定会溶血，所以不管保存时血细胞是否破损，都应该对结果没有显著的影响。 |
2楼2009-06-30 17:29:11
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参考体内药分书 血样：血浆(plasma)和血清(serum)是体内药物分析最常采用的样本，其中选用最多的是血浆。因血浆中的药浓可反映药物在体内（靶器管）的状况。而且血浆中药物浓度的数据报道较多，可供借鉴。血浆是全血(whole blood)在加肝素、枸橼酸、草酸盐等抗凝剂的全血经离心后分取，量约为全血的一半。血清则是在血液中纤维蛋白元等影响下，引起析出血块，离心取得。血块凝结时往往易造成药物吸附损失。全血也应加入抗凝剂混匀，以防凝血。对大多数药物来说血浆浓度与红细胞中的浓度成正比，所以测定全血也不能提供更多的数据，而全血的净化较血浆与血清麻烦，尤其是溶血后，血色素等可能会给测定带来影响。但是一些可与红血球结合或药物在血浆和血球的分配比率因不同病人而异的情况下，则宜采用全血。血样采取量会受到一定的限制，血样取样时间间隔问题也常随测定目的不同而异。目前大都是测定原型药物总量。当药物与血清蛋白结合率稳定时，血药总浓度可以有效表示游离药物的浓度。但对低蛋白症或尿毒症患者，药物结合率降低，则在通常安全有效的血药总浓度中，游离型药物浓度可显著增加。 样品储存和稳定性考察：取样后最好立即进行分析，冷藏(4℃)、冰冻(-20℃)有时也不能完全保证样品不起变化。尿液是很好的细菌生长液，若需收集24小时或更长时间的样品或不能立即测定的，应置冰箱冷藏或加防腐剂（1%甲苯、过饱和氯仿）保存。分析样品贮存时应考虑：储存条件；样品在贮存中会对分析结果产生什么影响；评述样品稳定性时会发生什么问题；如何预防或校正不稳定样品的分析结果。 |
3楼2009-07-01 13:11:17
ysh2225
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4楼2009-07-02 13:40:20
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