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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 关于染色体的插入失活
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caiqingchong

木虫 (著名写手)

[交流] 关于染色体的插入失活

现在我这里有一上一届的同学留下的一基因敲除菌，是在这个基因内部插入了一个抗性基因。
       请问一下在培养菌的时候是否必须加入抗生素，如果不加的话这个抗性基因是否会掉下来造成回复突变？因为加入抗生素有点影响菌体浓度，再说如果上罐培养的话抗生素成本有点高。
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1楼 2009-06-15 10:07:54
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anik

银虫 (正式写手)
★
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小规模培养的话应该需要加的吧。发酵那块，加不加就不知道了
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2楼2009-06-15 10:20:52
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yuweibest

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
是呀！为了保证不丢失你的抗性基因，实验时应该加入抗生素的！但是在大规模发酵时要看你发酵的什么菌，要什么产物以及抗生素的价格来决定是否加入。如果你要发酵后的菌体是可以加入一些的，来保证菌体的纯度。如果你要发酵液，那最好考虑下游的分离纯化（抗生素是否方便的与发酵液分离）。如果抗生素较昂贵，那就要根据你的产品价值来决定了！
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3楼2009-06-15 10:55:04
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生物之渊

铜虫 (小有名气)
★
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恢复突变和你加不加抗生素没有太大关系。有抗生素基因，方便筛选。发酵培养要发酵液，我建议不加。如是菌体可以加。抑制杂菌生长。具体问题具体分析吧。
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4楼2009-06-15 11:03:44
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caiqingchong

木虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by 生物之渊 at 2009-6-15 11:03:
恢复突变和你加不加抗生素没有太大关系。有抗生素基因，方便筛选。发酵培养要发酵液，我建议不加。如是菌体可以加。抑制杂菌生长。具体问题具体分析吧。

加抗生素后那些回复突变的菌体就不会生长，我是这个意思吧。
如果不加的话，回复突变的菌如果太多，就会影响产物产量的。

这种突变失活的菌，回复突变的几率到底大不大？
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5楼2009-06-15 12:04:47
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琉璃湖畔

木虫 (正式写手)
★
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只听说过基因敲除技术，还没有真正遇到过这种菌~~
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淡定淡定，须知努力就好
6楼2009-06-15 13:09:55
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stfo

铜虫 (小有名气)
工程菌一般都是双交换吧，比较稳定，而且每批的种子都是在抗性中长起来的，应该没问题，不用加，没有听说过上500L的罐还加抗生素的
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7楼2009-06-15 15:10:14
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