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695

木虫 (职业作家)

[交流] RACE问题求救

大家好,我现在做RACE试验,有点苦恼,我的阳性对照结果出来的很好,但是阴性对照,分别加单UPM或GSP之类的结果也能扩出条带,希望大家给点批评性意见,谢谢
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lifeip

至尊木虫 (知名作家)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
单UPM或GSP能扩增出的条带是单引物的非特异性扩展产物,可能是引物设计不好的原因,楼主也可尝试改变PCR条件,提高扩增特异性。
3楼2009-06-15 00:32:56
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gastrodia

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
如果是GSP单独都可以扩出来带说明引物设计的不是太好,需要重新设计引物,至于UPM扩出来的那条浅浅的带你不用担心,只要你用UPM 和你的GSP能扩出来目的片段大小差不多的片段就可以选择割胶回收
2楼2009-06-14 22:02:25
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695

木虫 (职业作家)

好的,多谢各位,我的材料是豆科的,我设计的引物做了BLAST后,特异性挺高的,也可能是与我的未知片段的结合吧
4楼2009-06-15 05:50:46
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