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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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huage6078

主管区长

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

[交流] 我想分离收集一个真菌的次级代谢物,关于HPLC和TLC求助

我想分离收集一个真菌的次级代谢物,我第一次涉及这个方面,
看到有的文献用TLC,有些不是很明白,来请教各位。

我们实验室只有HPLC,是安捷伦的半制备液相,和一台国产的制备液相,
公共实验室还有一台质谱。
就这三样仪器,可以尽可能多的把这个微生物的代谢物分离鉴定出来吗?
1. 我用不同的萃取剂萃取出来的液体,浓缩干燥溶解之后是否能直接上HPLC把他们通过馏分收集的方法给收集出来。
这个方法可行吗?
   是不是不同的流动相,不同的萃取剂,不同的检测波长收集的物质也还是有很大的差别的?
2. TLC的作用是不是让相近的结构的物质跑在一块,为了单独的收集分离。
  减少上HPLC样品中物质的数量?


这个微生物的代谢物很多已经报道出来了,我可以参照有些波长。  关于试验的可行性与方法,内行的朋友给点意见!谢谢了。
实在太困了,不是写的大家能不能看懂,我明天再来。呵呵
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huage6078

专家顾问

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[quote]Originally posted by jinzhongchong at 2009-6-10 14:43:
“粗提物最好是经过常压柱或者中低压柱层析进行粗分离”
在请教一下, 常压柱是什么意思? 中低压是不是类似于薄层层析啊
谢谢啊
6楼2009-06-10 16:39:28
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阿德8001

兑换贵宾

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huage6078(金币+1,VIP+0):xiexie 6-10 10:32
按照文献的处理方法处理。收集可能的峰,作质谱。最好在做个氢谱确定一下。
文献方法无法参考:用乙酸乙酯萃取发酵液。用甲醇或丙酮提取菌丝体,然后把甲醇或丙酮蒸干,乙酸乙酯分液。合并两个乙酸乙酯层。上液相之前最好过一根柱子。还是参考文献,看看人家用什么流动向过正相柱。如果他没有用正向柱,你最好在用HPLC之前再用环己烷(石油醚)/90%甲醇水萃几回,甲醇层过滤膜然后上HPLC。
2楼2009-06-10 03:22:03
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匿名

实习版主

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huage6078(金币+1,VIP+0):xiexie 6-10 10:32
本帖仅楼主可见
3楼2009-06-10 07:38:45
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huage6078

超级版主

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谢谢两位啊。
关于代谢物有几大类的。
1.
Anthraquinones
2.
Daucanes
3.
Simple pyrones
4.
Nitrogen heterocyclic compounds
5.
Azaphilones
6.
Harzialactones and derivatives
这些专业名词不会翻译,呵呵。
这些都是一个属的菌产的代谢物。
还有我们实验室只有反相的柱子,国产的制备的液相还没有安装。  
反相柱子和正向的对于分离鉴定和制备影响大吗?
谢谢了
4楼2009-06-10 11:08:59
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