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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » [求助]关于提取DNA，请大家帮忙分析一下
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ugvgw

铜虫 (小有名气)

[交流] [求助]关于提取DNA，请大家帮忙分析一下

大家好：

有些问题想求助你们。

我们最近做了一个从猪肝中提取DNA的实验，可是提取出来的DNA用玻璃棒转不起

来，而且根本看不到丝状物，很是纳闷，请大家帮我解释分析一下原因，万分感谢

为什么提取出的DNA怎么用玻璃棒缠不起来，全碎了么？还是提取的不好？

我们用的是浓盐法提取的，实验中我们用了SDS分离核蛋白和用了EDTA-NaCl缓冲

液，离心机离心。是不是在匀浆猪肝时不应该用高速匀浆机的？我们匀浆了10分钟

有人知道这方面么？还有，用高中那种浓盐法提取血细胞中DNA的方法

就是只用玻璃棒搅拌的，这种方法能从猪肝中提取出DNA么？

谢谢了！急着想要答案。我在这先扣谢各位了。
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1楼 2009-06-05 23:30:53
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373668567

木虫 (著名写手)
擦把汗，路过
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2楼2009-06-06 00:06:04
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charlies929

至尊木虫 (正式写手)
★
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没做过这个实验，不过我们实验室从组织中提总DNA都是使用Kit的，这样效率会高很多，价格也不是很贵（我们用的是德国的MN），但DNA的质量绝对比自己配溶液提好很多的。
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3楼2009-06-06 10:03:17
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★
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居然用到玻璃板……
那就肯定是很粗糙的实验方法了
不过主要看你的下游实验是什么
像提DNA这种，最好还是买试剂盒，国产的完全可以满足
现在都同质化了
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4楼2009-06-06 12:58:24
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ilaveu

木虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by ugvgw at 2009-6-5 23:30:
大家好：

有些问题想求助你们。

我们最近做了一个从猪肝中提取DNA的实验，可是提取出来的DNA用玻璃棒转不起

来，而且根本看不到丝状物，很是纳闷，请大家帮我解释分析一下原因，万分感谢

为什么提取出 ...

这个好像是分子大实验中用到的方法
不过实际提DNA现在一般都用盒子了
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5楼2009-06-06 13:09:31
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wwlingling

★
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是不是在匀浆猪肝时不应该用高速匀浆机的？我们匀浆了10分钟
我估计DNA断完了，在提取的时候用力振荡都会使DNA断裂
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6楼2009-06-06 13:36:13
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2008116068

木虫 (著名写手)
★
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浓盐法提取到的量大，棒缠不起来的话可以用二倍体积的无水乙醇沉淀离心也可以的。
分离核蛋白是用酚氯仿异戊醇
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只要踮起脚尖，就离太阳更近一点！！！
7楼2009-06-06 15:55:26
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大海一孤舟

铜虫 (小有名气)
★
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你都没消化其他的蛋白质，里面的蛋白质含量一定很高的，跟DNA很容易结合的。
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8楼2009-06-06 22:13:27
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ugvgw

铜虫 (小有名气)
谢谢大家了，我们做的实验都是在学校做的，所以实验条件有许多方面达不到。
实验又做了一次，做成功了，玻璃棒缠不起来就上一次实验分析，因为匀浆时将其打碎了。非常感谢大家的帮助。
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9楼2009-06-07 08:19:15
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smurfen

至尊木虫 (著名写手)
只用CTAB法提过
也没有大提过
沉淀的时候有丝状的东西吧
不过俺觉得用牙签捞不起来
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Advances in Prevention of Thermal Runaway in Lithium-Ion Batteries
10楼2009-06-07 09:13:52
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