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求助！急需人工呼吸，猪卵母细胞成熟培养问题！急需人工呼吸
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本人研究生毕业试验需要做猪卵母细胞成熟培养，但是半年过去了成熟率始终上不来，跪求达人帮助。指点下。 我们实验室是在用NCSU23+20IU/ml hcg+20IU/ml pmsg +10%PFF做为成熟培养液，48小时检成熟，以出现第一极体为标志。培养条件是38.5摄氏度，饱和湿度，5%二氧化碳。 做了半年成熟率还是超级低！，20%左右吧，跟预期的60%差太远了。。跪求达人指点下啊，愿意拜师有这方面经验的高人！！！！ 对了，NCSU23配制中有些物质不容，搅拌好几个小时还是这样，该怎么办啊？ [ Last edited by wenfuan on 2009-6-8 at 18:39 ] |
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4楼2009-06-06 12:57:54
350784478
木虫 (正式写手)
- 应助: 3 (幼儿园)
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- 专业: 遗传学研究新技术与方法
2楼2009-06-05 14:18:13
讨论一下
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小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+2,VIP+0):欢迎发帖交流！ 6-6 12:56
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建议你找点外文文献看一下，或者陈大元或者在猪这方面发表过期刊的实验室的人询问一下，最好是不要太大师级的人物，大师只会把握方向，试验都是别人不知名的小人物作的，你的成熟率这么低激素使用量肯定有问题，如果没有猜错的话，你使用的是国产的吧？成熟后扩散怎么样呢？效果好吗？第一是激素的来源，第二是激素的浓度比例， 另外你的培养基建议最好少配一点，配完搅拌后常温过夜（放在超净工作台内防止污染封口可以用烧杯配然后用PE手套套上），这些配方只有实验室有，对外资料国内文献多数有问题，建议看外文文献， 如果还有什么问题可以共同交流-加我为好友，我也是新虫。 虽然调试要一段时间，但建议你换国外生产的激素后看外文使用剂量就能有质的飞跃，一定会令你激动不已的，我也走过你的弯路，但比你快，要学会求助同实验室的人，另外还要看外文相关文献，还要不耐烦的作，才能作出来啊， |
3楼2009-06-06 12:53:25
5楼2009-06-08 18:33:07
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