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初雪的寂寞

木虫 (著名写手)

[交流] 求助:关于HPLC分离思路(急!!!)

如果在没有文献参考的情况下,怎样建立样品的RPHPLC等度分离的思路?有没有高人指点一下,越详细越好~~
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crity328

至尊木虫 (著名写手)

★ ★
初雪的寂寞(金币+2,VIP+0):我这里已经规定为等度反相高效液相色谱,其它不考虑,应该怎样建立思路呢? 6-3 18:03
我个人认为从以下4点开始。
1.首先你要去跑一张紫外扫描,看此样品有无紫外吸收,如果没有紫外吸收的,你可以放弃用HPLC了,可以试着用GC了;如果有紫外吸收的话,再根据最大吸收波长进行初步流动相筛选实验了。
2.一般刚开始你可以试着用常用的反相色谱法先进行试验,流动相在选择上可以极性溶剂:水=50:50进行试验,再根据具体情况进一步选择。
3.其次如果反相不行的话就要可以尝试用正相色谱进行试验,正相一般选择用异丙醇与正己烷作为流动相,调节比例进行筛选。
4.以上不行的话可以用GC进行分析了。(再行不通的话建议做4大谱,把物质结构性质分析出来再确定)
本人一点小建议,请不要见笑。
故天将降大任于斯人也,必先苦其心志,劳其筋骨,饿其体肤,空乏其身,行拂乱其所为,所以动心忍性,曾益其所不能。
10楼2009-06-03 17:31:40
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jzz8035

木虫 (著名写手)

★ ★ ★ ★
初雪的寂寞(金币+1,VIP+0):如果没的参考该怎么办? 6-3 11:10
clkk216(金币+1,VIP+0):谢谢参与虫友讨论~! 6-3 16:22
xy4585618(金币+2,VIP+0):谢谢参与 6-3 16:43
首先要知道你检样品的性质,然后找到相关性质的化合物的文献,参考其流动相,进行自己样品的流动相的选择,就这样.
2楼2009-06-03 10:41:50
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初雪的寂寞

木虫 (著名写手)

引用回帖:
Originally posted by jzz8035 at 2009-6-3 10:41:
首先要知道你检样品的性质,然后找到相关性质的化合物的文献,参考其流动相,进行自己样品的流动相的选择,就这样.

如果对这个样品一无所知呢?该怎么办?
3楼2009-06-03 10:44:52
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silk184


初雪的寂寞(金币+1,VIP+0):我只是想在理论上了解一下思路,能给点儿具体的建议吗? 6-3 18:00
用三角形法进行流动相的优化,但是东西性质都不知道如何选用色谱柱?
4楼2009-06-03 12:29:46
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