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zhlq_mail

铜虫 (小有名气)

[交流] DNA降解问题求助!

我在试验中经常碰到有人问我引物和DNA反复冻融和使用对试验有无影响?为什么有影响?有什么影响?我无言,不知如何回答,请高手指教一二?


我的一师弟,ssr引物总是用,用完在桌子上放半天,可结果也没什么影响?无言!
另外,引物有必要在冰上融结在用吗?我有时比较急,直接用手暖或直接扔水浴锅里!
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Milanmy

银虫 (小有名气)


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Tris也是DNA酶的抑制剂,TE的离子强度很小,对PCR没有什么影响,除非特别敏感的后续试验。反复冻融引起降解的主要原因是溶液的pH值,偏酸就会降解,所以用缓冲液,这才是用TE的主要原因,建议看一下Roche的实验手册,小木虫就可以下!
14楼2009-06-02 18:27:35
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jqq1985

银虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我有一条引物用过大半年,不停地反复冻融,好像影响不是很大。
2楼2009-06-01 18:55:24
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ilaveu

木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
反复冻融可能会使DNA降解,但不是一定的
3楼2009-06-01 19:04:11
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Charlie1331

金虫 (正式写手)

我的引物-20℃存了俩月就不行了……难道和RP有关?…………
4楼2009-06-01 19:09:27
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