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mapple木子

铁虫 (小有名气)

[交流] 测半衰期

怎么测半衰期呀,给药途径是静脉注射,取血时间间隔怎么确定?各位大虾,请慷慨救助!!!!
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kidant

木虫 (正式写手)

just do it now!



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
下面是实验教材上的内容,看了应该明白怎么做了,时间间隔是根据药物的代谢时间确定的,一般要在全程至少取7~9个点,当然越多越好,实验数据多绘制的曲线准确。静脉给药的话一般药物是注射后5分钟为第一个点,如果代谢很快的需要取得更快,半衰期长的一般是半小时1个点,3个点后1小时或1个半(有时候是2个,视情况而定)小时1个点,随取随测,直至药物代谢完全。在学校时我们一般测一次差不多都要取十多个点,多的有取2、30个的,这个要看药物性质。

药物血浆半衰期(t1/2)的测定

【目的】

1.掌握药物血浆半衰期(t1/2)的测定方法。

2.计算血浆半衰期(t1/2)

【原理】  磺胺类药物在酸性溶液中,可与亚硝酸钠起重氮反应,产生重氮盐,此盐在碱性溶液中,与酚类化合物(麝香草酚)起偶联反应,形成橙色的偶氮化合物。利用光电比色法测定给药前后不同时间血浆药物浓度的变化。

当测定药物半衰期时,药物单次静脉注射给药后,可在不同时间取血检测药物浓度,至少取6~7个点,以判断曲线类型。若以药物浓度的对数对时间作图,得一直线,由直线上任意两点算出斜率。

斜率(b)=   
Igc1-Igc2

t1-t2


式中c1和c2为直线上任意两点浓度,t1和t2分别为该浓度相应的时间。

当符合一室模型药物静脉注射后,可准确地测知两个不用时间(t1,t2)的血药浓度(c1,c2)后,即可代入b= -K/2.303,求出消除率常数k。

k= - 2.303
Igc1-Igc2

t1-t2


而t1/2与k的关系如下:

t1/2 =
0.693

k


另一描述药物消除规律的有用参数是药物体内留存率(Rt),即每隔t小时体内留存药量占原药量的比率。T1/2与Rt的关系如下:代入公式:

       t1/2=-0.301
T
=
-0.301(t2-t1)

IgRt
Igc2-Igc1


式中c1,c2为不同时间的血药浓度。t2-t1为两次取血的时间间隔。本实验以磺胺嘧啶钠盐为例介绍药物半衰期t1/2的测定方法。求出该药物的血浆半衰期t1/2。

【材料】

1.动物:家兔;

2.器材:72-1分光光度计、离心机、离心试管、小试管、吸管、滴管、注射器(5ml、2ml)、塑料动脉插管、动脉夹、手术器械、免手术台、纱布、药碗、丝线;

3.药品:1%普鲁卡因、0.5%肝素、7.5%三氯醋酸、0.5%亚硝酸钠、0.5%麝香草酚、20%磺胺嘧啶钠盐。

【方法】

1.取体重2kg左右兔1只,静脉注射3%戊巴比妥钠1ml/kg耳缘静脉缓慢注射进行麻醉。仰位固定(前支交叉)在手术台上。剪去颈部的毛,并在颈部正中纵切开皮肤,分离气管,做气管插管。饨性分离颈总动脉和迷走神经,远心端结扎,近心端用动脉夹夹住,眼科剪剪一“V”形切口,插入细塑料管,以从颈动脉取血做好准备。

2.取离心试管4支,分别标记A、B、C、D,各加入7.5%三氯醋酸5.8ml,备用。

3.给药前,从上述准备好的兔颈动脉插管中取血2ml,置于A管中。(事先用0.5%肝素浸润试管)。

4.给兔由耳缘静脉缓慢注射20%磺胺嘧啶100mg/kg,并记录注射完毕时间。

5.给药后15分钟及65分钟左右,分别由颈动脉取血2ml,置入离心管B及C中。

6.将配制的磺胺标准液2ml加入离心管D中。

7.将A、B、C、D离心管摇匀,以2000转/分转速离心5分钟,取上清液1.5ml,各置于编号A、B、C、D的试管中,每管加0.5%亚硝酸钠0.5ml,摇匀,再加0.5%麝香草酚1.0ml,可见呈红色反应。置于72-1分光光度计内,以给药前A管为对照,在波长λ=525mm处测定B、C、D管吸收度。读出光密度OD值,代入以下公式进行计算。

【结果】  计算测定管的SD浓度

血浆中磺胺的浓度mg%=
标准管浓度
×测定管OD值

标准管OD值


根据上式分别求出C1,C2,代入下式计算出t1/2

                 t1/2=
-0.301(t2-t1)

Igc2-Igc1
2楼2009-06-01 09:32:57
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mapple木子

铁虫 (小有名气)

哦,非常谢谢!
3楼2009-06-01 15:35:15
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