| 查看: 680 | 回复: 9 | |||
| 当前主题已经存档。 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
weeqiang铜虫 (小有名气)
|
[交流]
【求助】玉米cDNA长片段扩增问题
|
||
|
在NCBI上找到了该基因的mRNA全长，根据全长设计了引物，全长2500bp，提取了RNA反转录为cDNA进行扩增，摸索了很多条件总是扩不出来，一点条带都看不到，这个基因的的表达量很低，也不知道有些什么问题，希望能得到各位虫友的帮助，我是新手有些都不是很懂.... [ Last edited by amisking on 2009-6-1 at 13:24 ] |
回复此楼» 猜你喜欢
今天系统多次维护，明天很可能放榜！
已经有5人回复
-
欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律
已经有74人回复
-
岩土工程学报什么时候才能终审完呐
已经有4人回复
-
时间戳又变了8-15
已经有25人回复
-
2027广东省杰青
已经有6人回复
-
快农历七夕节了，轻松一下，男人悄悄话，女施主请不要进来。
已经有3人回复
-
哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜？
已经有9人回复
-
咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否
已经有26人回复
-
我的国基提前知道中了，可是同事的操作让我实在接受不了，怎么会有这样的人
已经有16人回复
-
有时候，自然基金真的不能太认真 （我的申报经验）
已经有12人回复
★
amisking(金币+0,VIP+0):欢迎发帖交流！ 6-1 22:10
weeqiang(金币+1,VIP+0):我用的就是 Random还是多换换条件吧，我准备选择不同植物的这个基因，进行比对，找到保守性较强的一段设计一对引物不知道行不行 6-2 13:36
amisking(金币+0,VIP+0):欢迎发帖交流！ 6-1 22:10
weeqiang(金币+1,VIP+0):我用的就是 Random还是多换换条件吧，我准备选择不同植物的这个基因，进行比对，找到保守性较强的一段设计一对引物不知道行不行 6-2 13:36
|
不知道你用什么引物做的RT，建议用Random做一下，可能长度大一点的会有一些二级结构。有的基因用OligodT效果比较好，有的用Random效果好。如果还扩不出来建议换个位点重新设计引物。我们遇到过和你相似的情况，重设计引物后就扩出来了。 [ Last edited by Milanmy on 2009-6-1 at 22:04 ] |
9楼2009-06-01 21:58:37
350784478
木虫 (正式写手)
- 应助: 3 (幼儿园)
- 贵宾: 0.882
- 金币: 1255.8
- 散金: 12
- 红花: 3
- 帖子: 835
- 在线: 91.4小时
- 虫号: 576561
- 注册: 2008-06-20
- 性别: GG
- 专业: 遗传学研究新技术与方法
2楼2009-05-31 22:37:38
3楼2009-05-31 23:10:05
weeqiang
铜虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 206.3
- 帖子: 74
- 在线: 13.2小时
- 虫号: 451688
- 注册: 2007-11-04
- 性别: GG
- 专业: 作物种质资源与遗传育种学
4楼2009-06-01 13:22:04
25