24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
查看: 475  |  回复: 9
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

weeqiang

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助】玉米cDNA长片段扩增问题

在NCBI上找到了该基因的mRNA全长,根据全长设计了引物,全长2500bp,提取了RNA反转录为cDNA进行扩增,摸索了很多条件总是扩不出来,一点条带都看不到,这个基因的的表达量很低,也不知道有些什么问题,希望能得到各位虫友的帮助,我是新手有些都不是很懂....

[ Last edited by amisking on 2009-6-1 at 13:24 ]
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

guyue2885

银虫 (正式写手)

梯度PCR吧温度给确定好吧~~bless
8楼2009-06-01 16:10:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

350784478

木虫 (正式写手)


weeqiang(金币+1,VIP+0):非常感谢 6-1 13:22
我也遇到和你一样的问题,你要是还扩增不出来,那就找其他人帮你提取一下。我的情况就是这样,提取mRNA都挺好的,但是就是扩增不出PCR产物,最后我找了其他人帮我提了一次,然后也用她的试剂帮我跑了一次PCR,结果就出来了,你可以试一下。
朝为田舍郎,暮登天子堂。将相本无种,男儿当自强。
2楼2009-05-31 22:37:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ilaveu

木虫 (著名写手)

确实,实验有偶然性,找个实验高手代你做一下可能会出来
3楼2009-05-31 23:10:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

weeqiang

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by 350784478 at 2009-5-31 22:37:
我也遇到和你一样的问题,你要是还扩增不出来,那就找其他人帮你提取一下。我的情况就是这样,提取mRNA都挺好的,但是就是扩增不出PCR产物,最后我找了其他人帮我提了一次,然后也用她的试剂帮我跑了一次PCR,结果 ...

会不会和表达量有关呢?
我用的酶是LA
4楼2009-06-01 13:22:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复(可上传附件)
信息提示
请填处理意见