24小时热门版块排行榜    

查看: 693  |  回复: 9
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

weeqiang

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助】玉米cDNA长片段扩增问题

在NCBI上找到了该基因的mRNA全长,根据全长设计了引物,全长2500bp,提取了RNA反转录为cDNA进行扩增,摸索了很多条件总是扩不出来,一点条带都看不到,这个基因的的表达量很低,也不知道有些什么问题,希望能得到各位虫友的帮助,我是新手有些都不是很懂....

[ Last edited by amisking on 2009-6-1 at 13:24 ]
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

guyue2885

银虫 (正式写手)

梯度PCR吧温度给确定好吧~~bless
8楼2009-06-01 16:10:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

350784478

木虫 (正式写手)


weeqiang(金币+1,VIP+0):非常感谢 6-1 13:22
我也遇到和你一样的问题,你要是还扩增不出来,那就找其他人帮你提取一下。我的情况就是这样,提取mRNA都挺好的,但是就是扩增不出PCR产物,最后我找了其他人帮我提了一次,然后也用她的试剂帮我跑了一次PCR,结果就出来了,你可以试一下。
朝为田舍郎,暮登天子堂。将相本无种,男儿当自强。
2楼2009-05-31 22:37:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ilaveu

木虫 (著名写手)

确实,实验有偶然性,找个实验高手代你做一下可能会出来
3楼2009-05-31 23:10:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

weeqiang

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by 350784478 at 2009-5-31 22:37:
我也遇到和你一样的问题,你要是还扩增不出来,那就找其他人帮你提取一下。我的情况就是这样,提取mRNA都挺好的,但是就是扩增不出PCR产物,最后我找了其他人帮我提了一次,然后也用她的试剂帮我跑了一次PCR,结果 ...

会不会和表达量有关呢?
我用的酶是LA
4楼2009-06-01 13:22:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +35 医学老男孩 2026-08-13 82/4100 2026-08-17 19:18 by 我4大白菜
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +4 angus9576 2026-08-17 8/400 2026-08-17 17:26 by angus9576
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +8 wangze12014 2026-08-14 10/500 2026-08-17 17:05 by xter9665
[基金申请] 时间戳变了,能看出什么问题? +4 基诺咪客 2026-08-17 4/200 2026-08-17 16:10 by Vivilian
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜? +12 Ldrop2023 2026-08-13 15/750 2026-08-17 15:02 by 小豌豆_发芽
[基金申请] 今天系统多次维护,明天很可能放榜! +8 zju2000 2026-08-16 9/450 2026-08-17 12:20 by lmz0216
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +13 archvillain 2026-08-15 25/1250 2026-08-16 20:13 by zhaosm1982
[基金申请] 2027广东省杰青 +3 奶牛小黑 2026-08-15 6/300 2026-08-16 20:07 by 奶牛小黑
[基金申请] 快农历七夕节了,轻松一下,男人悄悄话,女施主请不要进来。 +3 Tide man 2026-08-14 3/150 2026-08-16 17:47 by jurkat.1640
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +7 启萌科技 2026-08-12 26/1300 2026-08-16 12:35 by 启萌科技
[基金申请] 有时候,自然基金真的不能太认真 (我的申报经验) +10 majunge000 2026-08-11 12/600 2026-08-16 08:18 by xli1984
[精细化工] 招聘 金属平磨液,抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] 各位道友,我要去昆明玩几天,回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +4 yuleib84 2026-08-11 4/200 2026-08-14 23:05 by lfy8008
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[基金申请] 重要来源:本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] Filecode 又变了,巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 结合人工智能,周易传统文化,filecode打分制来了,3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
信息提示
请填处理意见