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haylig

铜虫 (小有名气)

你们用salI一般切多长时间,要一夜吗?
11楼2009-06-02 19:36:14
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w.king124

金虫 (正式写手)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
一定要拿磷酸酶去5‘磷酸化的,要不吃的苦头可就大了
12楼2009-06-03 10:58:24
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w.king124

金虫 (正式写手)


最好设定1:3——1:10几个梯度,摸索一下最佳配比
13楼2009-06-03 10:59:32
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
感觉连接就像看rp一样,不过多做几次,应该会做出来的,反正做一轮周期也不是很长,同楼上,摸索好配比。
单酶切切长点时间,过夜看看,另外建议酶切体系放大点试试。个人实验经历看来,放大酶切体系很好使。
Thank-you,so-blue.
14楼2009-06-03 12:48:10
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haylig

铜虫 (小有名气)

我最近老遇到酶切后回收不到东西的情况,是挥发了吗,酶切8h,酶切体系还挺大的,100微升的,怎么回事呀,浪费了不少酶
15楼2009-06-09 20:53:07
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haylig

铜虫 (小有名气)

设计引物时酶切位点salI前要加几个保护碱基,我加了四个,但是NEB的技术说最少要加六个,还有加入保护碱基和酶切位点后整个引物就有发夹结构,两条引物互补的的碱基为8个,这个影响大吗?
16楼2009-06-09 20:59:02
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