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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 求解电泳问题
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jane8398

铜虫 (初入文坛)

[交流] 求解电泳问题

我是电泳新手,想请问各位老手一下,在分离胶表面没有聚集成一条细的区带,这是什么原因?样品是刚纯化的抗体

[ Last edited by amisking on 2009-5-28 at 14:55 ]
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1楼 2009-05-27 13:29:59
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amisking

荣誉版主 (文坛精英)

优秀区长优秀版主
不是很懂你的意思，是电泳前还是电泳后！
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如果没有人帮助你，那么你就去帮助别人。
2楼2009-05-27 13:33:43
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zswx1

★
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我也不是很懂你的意思？SDS-PAGE？  不凝的话可能是ASP存放时间过久，或者TEMED加的量不足或者过期。
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3楼2009-05-27 14:22:50
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mgangle

铁杆木虫 (著名写手)

乐乐家族-----乐颠颠
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
SDS胶的浓度不够！或者是Tris-Cl的ph值不对吧！
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麦兜麦兜~~~我要一碗鱼丸粗面。。对不起，么有鱼丸粗面。。那，我要鱼丸么有鱼丸那，我要粗面…………么有粗面那，我要鱼丸粗面……………………
4楼2009-05-27 14:45:06
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anik

银虫 (正式写手)
★
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是你在跑积层胶的时候电压过大，可以降低电压（90V），样品进入分离胶后在加大电压。
另一方面，在配制积层胶的时候，浓度分布不均一。
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5楼2009-05-27 14:48:33
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
也有可能是样品上样量过大
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6楼2009-05-27 15:32:31
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DLLB

金虫 (小有名气)
我觉得是上样量太大了
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7楼2009-05-27 15:41:42
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sutao1979

木虫 (著名写手)

小木虫10年groupleader
主要原因有如下：
1.分离胶的浓度不够，或者有问题
2.分离胶的ph值一般是8.8，堆积胶是6.4吧，有可能是分离胶ph值没调好
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会当凌绝顶，一览众山小
8楼2009-05-28 14:53:47
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cwz1971

铜虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
SDS胶的浓度不够！或者是Tris-Cl的ph值不对吧！
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9楼2009-05-28 14:55:37
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大海一孤舟

铜虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
这个问题我们这边的本科生实验经常碰到，都是由于在浓缩胶的时候就用很大的电压，其实很多的时候都是用一样的电压跑到底的。只要在跑浓缩胶时用较小的电压，等到压缩成一条直线再跑就可以了。另外跟电泳仪也有一定的关系，导电线有时候会弯曲导致电压不均衡。希望对你有帮助！！！
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10楼2009-05-28 15:05:12
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