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zhuguozhen1115

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助】MTT实验怪现象

各位大侠,本人最近刚刚开始做MTT实验,在实验中出现一个比较怪的现象,调零孔(加RPMI1640培养液150ul+PBS50ul+MTT20ul(5mg/ml),然后翻版倒掉,再加150ul DMSO)结果调零孔也会出现变色,且颜色较深
注:我还进行了以下的实验:
1 加RPMI1640培养液200ul+MTT20ul(5mg/ml),马上翻版倒掉,再加150ul DMSO,仍然显色
2 加DMEM培养液200ul+MTT20ul(5mg/ml),马上翻版倒掉,再加150ul DMSO,仍然显色
3加PBS200ul+MTT20ul(5mg/ml),然后翻版倒掉,再加150ul DMSO,基本不显色
4 加RPMI1640培养液150ul+PBS50ul,翻版倒掉,再加150ul DMSO,基本不显色
所以我认为是我培养基会与MTT反应,致使最后显色,不知是否可以确定,再有,不知大家在做MTT时有没有遇到过类似问题,在网上搜了一下,好像也有人遇到过,请教解决方案,谢谢了,谢谢

[ Last edited by zhuguozhen1115 on 2009-5-22 at 09:50 ]
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zhuguozhen1115

金虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by diplomatqs at 2009-5-24 08:17:
谷氨酰胺和酚红是都有的,应该不是与MTT反应的问题,我觉得有可能是DMEM在孵箱中被污染了,检查孵箱。还有就是你的MTT是否有问题,重配一下。
建议你用DMEM不进孵箱直接加MTT,翻版后加DMSO,看看是否显色,如果 ...

我用1640和DMEM都试过,不进行孵箱直接加MTT,让然显色,颜色是浅的紫红色
9楼2009-05-24 11:18:41
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441273385

木虫 (小有名气)

没注意过 有空试试
http://www.opiker.com/index.php?inductid=7aa2586247a3048acd119e28b03f26df 天天挂着 哈哈 http://www.28bux.com/Recommend.aspx?ID=91822 弄点零花钱
2楼2009-05-21 19:56:14
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diplomatqs

金虫 (小有名气)


karl2100(金币+1,VIP+0):多谢提供! 5-23 23:19
显色是因为你的细胞污染了,我用的是DMEM+MTT
相信我,我做实验时被这个问题困扰好久了,关于MTT你就记住两点:
1.不该显色时显色,找污染
2.改显色时不显色,细胞活力或密度不够。

祝你好运!
3楼2009-05-23 07:35:55
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zhuguozhen1115

金虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by 441273385 at 2009-5-21 19:56:
没注意过 有空试试

有空试试啊,谢谢,呵呵

[ Last edited by zhuguozhen1115 on 2009-5-23 at 18:33 ]
4楼2009-05-23 18:31:37
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