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melodyxin

铜虫 (小有名气)

[交流] 质粒电泳中遇到的问题!!!!

之前做的转化子,抽提质粒——大小正确;测序——大小正确。

昨天把保藏的菌种接种后提了8管质粒,电泳发现一个问题:

与之前抽提的质粒电泳比较,环状的、开环的质粒条带都在一个水平线上,但在环状质粒条带下方还有一条浅浅的条带。——出现了第三条带,不知道是什么东西?是染菌?还是存在另一个质粒?或者是别的什么原因????
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melodyxin

铜虫 (小有名气)

sxdxrhyy(金币+0,VIP+0):在上传附件栏里 5-21 20:14
不晓得怎么上传图片~
2楼2009-05-21 20:08:10
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dianaofyezi

金虫 (正式写手)

一般质粒电泳之后会出现三条带,这在分子克隆的教材中是正常现象。
52187644
3楼2009-05-21 20:28:42
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DLLB

金虫 (小有名气)

同意楼上观点
4楼2009-05-22 10:21:14
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melodyxin

铜虫 (小有名气)

不是的,一般三条带依次为超螺旋、开环和线性;但手提质粒(也就是不用试剂盒抽提的质粒)很少能提到开环的,一般是超螺旋、复制中间体和线性。
但我提到的第三条带是在超螺旋之前的,不晓得是什么东西,怎么解释。
5楼2009-05-24 19:44:32
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w.king124

金虫 (正式写手)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
1.RNA没除净
2.做一个酶切看看,是否为同一个质粒
6楼2009-05-25 11:43:56
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melodyxin

铜虫 (小有名气)

第一个泳道是我第一次提的质粒,第三个泳道就是我第二次提的质粒。参见附件。
7楼2009-05-26 11:28:05
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melodyxin

铜虫 (小有名气)

不知道底下那条带是什么。。。。
8楼2009-05-26 11:28:58
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melodyxin

铜虫 (小有名气)

有人吗?
9楼2009-06-02 10:19:06
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

酶切鉴定之
10楼2009-06-02 10:25:30
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