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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » GC含量超过60%的引物可用吗
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clf0803

银虫 (正式写手)

[交流] GC含量超过60%的引物可用吗

因为模版本身GC含量较高，所以引物最后GC%在63%，请问大家，PCR成功率会怎样？谢谢
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1楼 2009-05-19 22:46:05
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
可用，我试过近70都能扩
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2楼2009-05-19 23:02:19
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再见苏摩

银虫 (初入文坛)
看你模板是什么，如果模板是质粒，再烂的引物都合成得出
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3楼2009-05-20 09:16:38
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amilie030312

金虫 (正式写手)
呵呵，楼上的讲的不科学但是超级有道理，可以扩扩试试，如果不行就换成耐受高GC的酶来进行扩增就可以了。
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4楼2009-05-20 10:12:46
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bbyu007

木虫 (正式写手)
能用，不行就加点DMSO~~~~~~
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我是笨笨鱼~~~
5楼2009-05-20 10:30:04
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lifefamily

如果是从文库里拉，可能有问题。
如果是P质粒，3楼已经说了……
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6楼2009-05-20 13:22:37
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豆豆羊

可以的
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7楼2009-05-20 14:07:49
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jqq1985

银虫 (正式写手)
引物是用来配对的，GC含量高只会影响退火温度，对PCR延伸没有影响，但是你模版的GC含量高，可能对PCR成功与否有挺大的影响的
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8楼2009-05-20 18:24:52
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