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clf0803

银虫 (正式写手)

[交流] GC含量超过60%的引物可用吗

因为模版本身GC含量较高,所以引物最后GC%在63%,请问大家,PCR成功率会怎样?谢谢
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

可用,我试过近70都能扩
2楼2009-05-19 23:02:19
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再见苏摩

银虫 (初入文坛)

看你模板是什么,如果模板是质粒,再烂的引物都合成得出
3楼2009-05-20 09:16:38
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amilie030312

金虫 (正式写手)

呵呵,楼上的讲的不科学但是超级有道理,可以扩扩试试,如果不行就换成耐受高GC的酶来进行扩增就可以了。
4楼2009-05-20 10:12:46
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bbyu007

木虫 (正式写手)

能用,不行就加点DMSO~~~~~~
我是笨笨鱼~~~
5楼2009-05-20 10:30:04
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lifefamily

如果是从文库里拉,可能有问题。
如果是P质粒,3楼已经说了……
6楼2009-05-20 13:22:37
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豆豆羊

可以的
7楼2009-05-20 14:07:49
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jqq1985

银虫 (正式写手)

引物是用来配对的,GC含量高只会影响退火温度,对PCR延伸没有影响,但是你模版的GC含量高,可能对PCR成功与否有挺大的影响的
8楼2009-05-20 18:24:52
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