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fyl7166

金虫 (小有名气)

[交流] 有关大孔吸附树脂

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各位虫子,大家好,我刚刚开始接触大孔吸附树脂纯化黄酮、皂苷等物质的实验,有很多地方不太明白,请教一下各位,希望大家多给意见!非常感谢!
1.上样液一定要用水溶吗?我的样品水溶性较差,会形成悬浊液!想用有机溶剂溶解又怕给后面的洗脱带来麻烦!我现在用的是乙醇洗脱。
2.如果洗脱下来的溶液也浑浊该怎么办?
3.我的样品中含有叶绿素,是不是应该先除去再上样!
4.大孔树脂只能纯化吗?可不可以用不同的溶剂来分离!
5.可以像硅胶柱那样将样品和硅胶粉拌在一起,然后干燥再上柱,再用不同溶剂来洗脱的到不同洗脱液吗?
希望高手指点,谢谢!
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leonard187

木虫 (著名写手)

★ ★
karl2100(金币+1,VIP+0):谢谢参与讨论! 5-18 23:50
fyl7166(金币+1,VIP+0):谢谢 5-20 08:30
引用回帖:
请问一下,从水到90%醇的洗脱,什么情况下选择换溶液呢?例如,水冲的时候浑浊,一般冲多少体积后换30%醇,是不是洗脱液澄清为止?谢谢大侠!

大侠谈不上,我也在学习中。我们一般每个梯度4-5个保留体积(每个梯度多接几瓶,可以用TLC监测一下)。而且一般冲到差不多时洗脱液颜色会变浅。其实都是粗略的。一定会多少有些交叉。粗分嘛。
仅仅是个人习惯,仅供参考哈。
关于大孔树脂的材料很多,建议楼主去参考一下。

[ Last edited by leonard187 on 2009-5-18 at 21:16 ]
燃烧的冰
7楼2009-05-18 21:13:57
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leonard187

木虫 (著名写手)

★ ★ ★
fyl7166(金币+1,VIP+0):谢谢 5-18 18:11
fyl7166(金币+1,VIP+0):请问一下,从水到90%醇的洗脱,什么情况下选择换溶液呢?例如,水冲的时候浑浊,一般冲多少体积后换30%醇,是不是洗脱液澄清为止?谢谢大侠! 5-18 18:34
xy4585618(金币+1,VIP+0):谢谢参与 5-23 16:17
1一定要用水溶,因为初始极性就是水啊,直接用醇不是直接冲下来了?混悬也是可以的。
2最开始会有一些悬浊物出来,应该是泄漏液,超载部分,或许是水溶性物质。不去管它好了。
3叶绿素没做过……不知道^0^
4大孔树脂可以用来粗分样品,一般是水-乙醇或甲醇,按水---30%醇---50%醇----70%醇---90%醇顺序洗脱
5大孔树脂好像没有干法……

[ Last edited by leonard187 on 2009-5-18 at 17:23 ]
燃烧的冰
2楼2009-05-18 17:17:27
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sara_wang

金虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★
fyl7166(金币+2,VIP+0):太感谢了 5-18 18:13
fyl7166(金币+1,VIP+0):谢谢你,我的邮箱是fyl7166@163.com 5-19 10:10
xy4585618(金币+1,VIP+0):谢谢参与 5-23 16:17
1基本上都会选择水溶液上柱,,我觉得你说的浑浊液很可能那些沉淀不是你要的东西,一般上柱前会进行醇沉或者离心来除去糖、淀粉等杂志,你那些浑浊的很可能是这一类的,建议你把不溶的东西滤出来,那有机溶剂点版看看看是否有你要的黄酮类和皂苷类。如果含有,你可能浑浊上柱,一开始水冲会慢一些,但是冲到高浓度的醇就会好的,不用担心。
2基本不会洗下浑浊液的,如果有也只会是刚开始有一点,那是因为你载样量过大,泄露了,你把泄露出来的收集起来,以后还可以当原液用
3如果你醇沉后再上柱的话,叶绿素就已经被除掉好多了
4大孔树脂的应用有很多,不光可以纯化,如果你有兴趣的话,把你的信箱给我,我有一些文献可以发给你,你可以看看
5可以拌在一起,但是不能干燥,我曾试过用原液泡一部分大孔树脂,吸附4小时后再上柱洗脱,效果不错,楼主可以试一试
3楼2009-05-18 17:22:35
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fyl7166

金虫 (小有名气)

共同学习,共同进步
4楼2009-05-18 18:13:38
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