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luke1979金虫 (正式写手)
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[交流]
【求助】细胞如何做TEM？
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本人制备了磁性纳米粒子，希望通过透射电子显微镜看它能否进到Hela细胞里面，纳米粒子和细胞培养两天后，我该如何处理之后，照TEM。 诚心感谢各位虫友，请描述的具体一点，我不是学生物的，对细胞不太懂。谢谢！！！ |
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lotus9
木虫 (著名写手)
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zhangwj(金币+2,VIP+0):谢谢 5-18 14:36
luke1979(金币+3,VIP+0):说明的太好了，谢谢，请问你知道在北京哪个学校或研究所能提供上面操作的仪器或工具么？ 5-18 20:28
zhangwj(金币+2,VIP+0):谢谢 5-18 14:36
luke1979(金币+3,VIP+0):说明的太好了，谢谢，请问你知道在北京哪个学校或研究所能提供上面操作的仪器或工具么？ 5-18 20:28
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细胞样品2.5%的戊二醛磷酸缓冲溶液固定24h，0.1M PBS溶液清洗3-4次， 1%锇酸后固定，PBS溶液清洗3-4次，然后经50%, 70%, 80%, 90%, 95%, 100%丙酮逐级脱水。 脱水后的样品用618环氧树脂包埋。将包埋好的样品修整好，修块，切半薄片进行观察定位。再用金刚石刀切超薄切片，厚度约为75nm，置于镀有碳膜的铜网上。再分别经过30分钟1%醋酸铀和10分钟的柠檬酸铅双重染色，0.02M氢氧化钠溶液清洗15~20次后，双蒸水冲洗，滤纸吸干。用透射电镜进行观察。 |
3楼2009-05-18 14:34:14
lotus9
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4楼2009-05-18 21:52:34