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樱桃9852

[交流] 血样预处理的问题

请教：本人做的是含葛根素的血样预处理，查文献多数用的6%高氯酸按1：1体积比，15000r/min离心10min，取上清液进样，但是我用同样方法处理后，血中仍有杂质峰的干扰。请大家帮忙指点。非常感谢！
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1楼 2009-05-16 11:28:22
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依水佛兰

银虫 (正式写手)
上预柱。。。
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我的小药房 [url]http://amiyahome.blog.163.com[/url] 收集有关药物的点点滴滴……
2楼2009-05-17 10:12:35
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普鲁卡因

银虫 (小有名气)
★
karl2100(金币+1,VIP+0):谢谢发言！ 5-17 21:05
调节高氯酸的浓度；要不取上清液再离心一次
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3楼2009-05-17 10:41:42
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樱桃9852

我有试过取上清液再离心一次，没什么效果，上预柱又没那个实验条件。哎
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4楼2009-05-17 16:06:06
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shine_chen

金虫 (初入文坛)
★
karl2100(金币+1,VIP+0):多谢提供！ 5-18 00:36
试试用有机溶剂沉淀法，加5倍量的甲醇或乙腈沉淀，离心后的上清吹干，可以起到富集成分的作用，然后加入100uL的流动相复溶，再离心，取80uL左右的上清进样就可以了。对葛根素这种极性稍大的黄酮苷可以考虑用固相萃取做，不过成本就上去了。个人不是很喜欢高氯酸法，总害怕成分在处理过程中变掉，可能是多虑了
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5楼2009-05-17 23:11:50
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diannao001

铁杆木虫 (小有名气)
★
karl2100(金币+1,VIP+0):多谢提供！ 5-27 22:54
我用过高氯酸处理血清样品，效果可以啊。如果你的效果差实验室又没有购买预柱的条件，建议你自制一个固相萃取装置，可以用注射器针管就行了，加上填料，过滤效果较好。
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6楼2009-05-24 20:16:14
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sincerejhy

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
沉淀蛋白虽然简便、但是没有有机溶剂提取法提取的干净，试试有机溶剂提取法或者用固相萃取试试。
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笃信，朴实无华，最真最美！
7楼2009-05-27 12:29:29
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songxinwb

新虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
1：1的比例是不是有点大了！
试着把流动相比例，ph值改变一下，看看是否可以分开
高氯酸沉淀，建议使用预柱，国产的很便宜了
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8楼2009-05-29 13:50:56
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