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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 求助：请问如何进一步提高蛋白的溶解度
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蓝色基因

金虫 (正式写手)
★
susizheng(金币+1,VIP+0):谢谢 5-18 10:04
我们实验室15-25度之间表达，一般为20度过夜培养。
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11楼2009-05-18 09:59:34
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lifefamily

★
susizheng(金币+1,VIP+0):谢谢交流 5-18 17:39
据我在生化所的了解，遇到包涵体多的蛋白，通常是融合蛋白+低温表达。
比如GST融合（楼主已经做了）下16°C过夜表达，再低就意义不大了。
另外，我们也用过一些除GST外其他的融合蛋白来帮助表达，比如Trx融合和GB1融合。
如果还是包涵体，那就只有再回头从序列入手，掐头去尾的剔除一些性质不好的序列，重新构建克隆。甚至分段表达，再体外连接。
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12楼2009-05-18 17:16:53
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jqq1985

银虫 (正式写手)
培养温度高点，蛋白的溶解度也大点。
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13楼2009-05-18 18:06:26
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baisuilan

金虫 (正式写手)
培养基里补加蔗糖、酒精等富营养化。
扩大培养液体积，OD值0.3就开始诱导。
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14楼2009-05-18 19:06:03
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