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synhily

木虫 (正式写手)

[交流] 有没有什么方法快速提取酵母基因组?

有没有什么方法快速提取酵母基因组?我用普通的方法,要一天才能提好,很慢,如果要提取的数量多则是一件很费力的事情。
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iaminxanadu

木虫 (正式写手)

快速分离酵母基因组DNA,需要配制破菌缓冲液及粗粒石英砂,仪器只需要蜗旋振荡器及离心机。

菌落PCR影响成功的因素主要来自于:菌龄,要挑取新鲜的菌(最好是刚长出的菌落的菌);挑取的量,用10微升的枪挑取1至2微升的菌体,不要多;最后切勿挑到培养基。

选择哪种关键是看你目的了,若做筛选当然是菌落PCR更快。
13楼2009-05-16 07:44:52
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zhaocy8903

木虫 (知名作家)

★ ★
synhily(金币+2,VIP+0):请问有没有摸好的菌落pcr条件啊,我用了一些方法还是不行,酵母细胞壁好厚呀。 5-12 19:30
干吗用
如果只是用PCR的话摸索一下菌落PCR条件吧
2楼2009-05-12 10:32:13
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liuke009

铁杆木虫 (著名写手)

我们组都是用试剂盒提,多用点试剂即可
3楼2009-05-12 10:51:54
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雨后郁金香

金虫 (小有名气)


synhily(金币+1,VIP+0):我用的是普通的方法,不是快速提取,我想请教的是能破掉酵母细胞壁的方法,也就是菌落PCR前的处理条件。 5-12 19:31
貌似分子克隆这本书上有酵母DNA的快速分离法啊~~~不知你用的是不是这个呵~~~
4楼2009-05-12 16:55:53
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