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fulixia

银虫 (小有名气)

[交流] 隐性(隐蔽)质粒的破译问题

近来想将一个基因通过载体导入到一种海洋弧菌中去,但试了多次均不成功,后来查资料才知道,弧菌中存在所谓的隐性质粒,而且其胞壁周质空间中的DNase也是外源质粒难以导入的原因之一.
文献中虽然有一些关于隐性质粒破译的文章,但看后仍感觉有许多不明之处,我们都知道基因公司测定序列的话,至少要知道其中的一段已知序列才能进行后续的序列测定,而对隐性质粒其序列一无所知的情况下怎么破译呢,前面那些文章貌似好象都知道质粒中的一些序列似的,也不知道他们是怎么得来的?还有就是如何去除弧菌潜在的隐性质粒,以便为导入外源质粒"让路"?希望有做过这方面研究的同志们加入这一讨论话题.

[ Last edited by fulixia on 2009-5-1 at 17:13 ]
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lsbrc

银虫 (小有名气)

只要你能提取得到该质粒DNA,就可以测序。在不知道任何序列信息情况下,可以采用酶切成小片段,然后亚克隆到一个已知的载体上,就可以测序了。
4楼2009-05-04 09:08:48
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dynamicren

木虫 (著名写手)

难题

这个有点难搞啊,搞出来就是好文章.
3楼2009-05-02 21:06:23
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