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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 多重引物PCR问题
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LIFERESET

新虫 (初入文坛)

[交流] 多重引物PCR问题已有9人参与

想问一下，我现在正在做多重引物PCR，是将100多条引物放到一个体系内
然后就出现了扩增抑制，除了删除部分引物以外，还有没有啥其他方法可以尽可能的减弱扩增抑制情况呢？
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王二妮good

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1楼2018-12-14 15:16:08
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makira

铜虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
一个反应体系内放入100多条引物？真的假的啊。引物之间互相干扰，能扩增出来才怪
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4楼2018-12-15 23:06:41
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查看全部 13 个回答

drwhoknowss

荣誉版主 (正式写手)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2018-12-18 09:36:56
浓度要合理，引物最终浓度要跟普通PCR差不多
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Progress in science depends on new techniques, new discoveries and new ideas, probably in that order. -- Nobel laureate Sydney Brenner
2楼2018-12-14 23:36:28
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LIFERESET

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by drwhoknowss at 2018-12-14 23:36:28
浓度要合理，引物最终浓度要跟普通PCR差不多

我试过了，PCR的体系目前已经固定在100uL了，然后引物终浓度最高也就0.6uM，还是不行，我真的是没办法了.....
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3楼2018-12-15 12:29:09
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GRUBBY_WU

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2018-12-18 09:37:20
引用回帖:
4楼: Originally posted by makira at 2018-12-15 23:06:41
一个反应体系内放入100多条引物？真的假的啊。引物之间互相干扰，能扩增出来才怪

100来条引物都不算多的，Qiagen用多重PCR做基因Panel的上千条引物都有。楼主可以看看Qiagen的产品，有专门做多重的试剂盒，或许有帮助。
赞一下(2人) 回复此楼
2019更好更棒!
5楼2018-12-16 14:13:20
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查看全部 13 个回答
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