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linus20056811金虫 (初入文坛)
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[交流]
求~~~~果胶酶酶活测定方法 已有4人参与
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1·2·3 果胶酶活力检测方法 1·2·3·1 聚半乳糖醛酸酶(PG) 样管:吸取0·2mL 稀释酶液于试管中,加1·8mL pH3·5的缓冲液配制的果胶底物溶液, 50℃水浴30min后,加2mL DNS,沸水浴10min,冷却后用蒸馏水定容到15mL,摇匀。空白:吸取0·2mL稀释酶液于试管中,加2mL DNS和1·8mL pH3·5的缓冲液配制的果胶底物溶液, 50℃水浴30min,冷却后用蒸馏水定容到15mL,摇匀。在550nm下测定其吸光值。在上述反应体系中,将果胶酶降解果胶底物每分钟产生1μg还原糖定义为一个酶活单位。 1·2·3·2 果胶酯酶(PE) 取4·0mL 1%果胶溶液,45℃水浴平衡5min,加入1·0mL待测酶液, 45℃保温60min,用0·02mol/L的NaOH滴定产生的羧基基团。将每分钟释放出lμmol羧酸的酶量定义为1单位果胶酯酶(PE)酶活。 1·2·3·3 果胶裂解酶(PL) 取2·0mL 0·5%果胶溶液于试管中, 40℃水浴平衡5min,加入0·5mL待测酶液, 40℃保温10min。取上述反应混合物0·5mL,加入4·5mL 0·01mol/L的HCl中,充分混合终止反应。在235nm处测定吸光值,不饱和双键的摩尔吸光系数为5200。将每分钟分解果胶,使235nm处消光值增加1·0的酶量定义为1单位果胶裂解酶(PL)酶活。 氮源 PG(U/mL) PL(U/mL) PE(U/mL) NH4)2SO4 26·34万 0·385 29758 NH4Cl 25·34万 0·247 26593 尿素 23·48万 0·530 21041 麸皮 26·18万 0·505 28626 ---------------------------------------------------------------------------------------------------------- 以上是在一篇论文里看到的 毕业设计也要测果胶酶酶活 可没有 PG PE PL的酶活计算公式 希望有人能够帮帮忙~\(≧▽≦)/~啦啦啦 能够帮多少忙 都写下来吧 都会有金币的 O(∩_∩)O谢谢 注意：①论文里PE用的是0·02mol/L的NaOH滴定 滴定管精确度有限 而最后结果精确到了个位 ②以上的果胶溶液浓度和配制溶液也不知道 查了好多其他资料也都不是很清楚 |
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5楼2012-03-10 18:52:08
linus20056811
金虫 (初入文坛)
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