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charln0601

[交流] 我的凝胶柱怎么了

我用的Sephadex G100凝胶,刚刚装上柱子流速就很慢,都没有控制管路流速,基本上每小时只能流出10ml左右,凝胶装柱前已经用NaOH处理过了,样品上样前也离心和过滤过了了,各处也没有堵住,请问这是什么原因呀
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charln0601

引用回帖:
Originally posted by epon at 2009-4-22 20:22:
不知您用的是什么溶剂上样啊?凝胶不同溶剂的溶胀系数不同,溶胀系数小,速度就慢!还有就是气泡问题,两相溶剂交换时会产生气泡的,柱子里有了气泡会影响流速的。所以,开始上样或洗脱或进行溶剂交换时,一定要慢 ...

我用的溶剂是水,G100凝胶要求是水溶胀,以前装过很好用,这次就像是堵住了一样,但是凝胶是透明的,也没有看到什么杂质,而且从开始装柱就很慢,开始层析的时候也只是用水,没有梯度洗脱,所以不会是交换产生的气泡,各处管路也没有堵塞现象,觉得很奇怪。
7楼2009-04-28 16:07:23
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pal2004

木虫 (正式写手)


clkk216(金币+1,VIP+0):谢谢参与虫友讨论~! 4-21 11:55
柱子径高比太小了吧,实在太慢就加压吧。
2楼2009-04-21 10:24:00
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charln0601

柱子的直径是2.6cm,高110cm,请高手们指教
3楼2009-04-21 14:13:51
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jmq0535

金虫 (正式写手)


karl2100(金币+1,VIP+0):多谢提供! 4-22 23:32
我们使用的是LH-20一般的情况我们是先用水充分膨胀
你的这个是不是NaOH浓度大了影响了凝胶的膨胀啊,建议重新装一下,按照你说的层析柱应该不会出现这样的情况。
4楼2009-04-22 00:53:58
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