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charln0601

[交流] 我的凝胶柱怎么了

我用的Sephadex G100凝胶，刚刚装上柱子流速就很慢，都没有控制管路流速，基本上每小时只能流出10ml左右，凝胶装柱前已经用NaOH处理过了，样品上样前也离心和过滤过了了，各处也没有堵住，请问这是什么原因呀
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1楼 2009-04-21 10:03:28
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pal2004

木虫 (正式写手)
★
clkk216(金币+1,VIP+0):谢谢参与虫友讨论~！ 4-21 11:55
柱子径高比太小了吧，实在太慢就加压吧。
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2楼2009-04-21 10:24:00
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charln0601

柱子的直径是2.6cm，高110cm，请高手们指教
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3楼2009-04-21 14:13:51
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jmq0535

金虫 (正式写手)
★
karl2100(金币+1,VIP+0):多谢提供！ 4-22 23:32
我们使用的是LH-20一般的情况我们是先用水充分膨胀
你的这个是不是NaOH浓度大了影响了凝胶的膨胀啊，建议重新装一下，按照你说的层析柱应该不会出现这样的情况。
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4楼2009-04-22 00:53:58
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charln0601

引用回帖:
Originally posted by jmq0535 at 2009-4-22 00:53:
我们使用的是LH-20一般的情况我们是先用水充分膨胀
你的这个是不是NaOH浓度大了影响了凝胶的膨胀啊，建议重新装一下，按照你说的层析柱应该不会出现这样的情况。

NaOH浓度是0.2M的，就是技术支持告诉的浓度，我也打算重新装柱子了
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5楼2009-04-22 18:38:18
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epon

木虫 (正式写手)
★
karl2100(金币+1,VIP+0):多谢指教！ 4-22 23:32
不知您用的是什么溶剂上样啊？凝胶不同溶剂的溶胀系数不同，溶胀系数小，速度就慢！还有就是气泡问题，两相溶剂交换时会产生气泡的，柱子里有了气泡会影响流速的。所以，开始上样或洗脱或进行溶剂交换时，一定要慢些。
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6楼2009-04-22 20:22:44
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charln0601

引用回帖:
Originally posted by epon at 2009-4-22 20:22:
不知您用的是什么溶剂上样啊？凝胶不同溶剂的溶胀系数不同，溶胀系数小，速度就慢！还有就是气泡问题，两相溶剂交换时会产生气泡的，柱子里有了气泡会影响流速的。所以，开始上样或洗脱或进行溶剂交换时，一定要慢 ...

我用的溶剂是水，G100凝胶要求是水溶胀，以前装过很好用，这次就像是堵住了一样，但是凝胶是透明的，也没有看到什么杂质，而且从开始装柱就很慢，开始层析的时候也只是用水，没有梯度洗脱，所以不会是交换产生的气泡，各处管路也没有堵塞现象，觉得很奇怪。
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7楼2009-04-28 16:07:23
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spianch

木虫 (小有名气)
是不是，凝胶没有活化。建议用酸，碱洗一洗，后重新装柱
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8楼2009-04-28 16:17:43
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