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w83365040371

铁虫 (初入文坛)

[交流] Pcr过程中,dNTP是怎么被加到要合成的DNA单链上呢?

我想问一下大家,在pcr的过程中,dNTP是怎么被加到要合成的DNA单链上呢?

退火的时候,引物与模板链结合,在那个时候dNTP会不会与模板链结合形成一种单链,单链中的dNTP没有相互连接,然后通过taq酶的作用形成完整意义上的单链?
还是,dNTP在taq酶的作用下,与模板链通过氢键结合,然后再形成磷酸酯键,完成单链的延伸?
还是其它原因?
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

建议lz用热动力学的眼光来看待这个问题
所谓的引物和模板的结合,不全然都是牢固的,而是一个动态的结合、解离过程,只是在那个温度下,自由能降使之倾向于结合态
dNTP也是如此,分子都是在不断碰撞中的,一旦撞上同时被Taq捕获,就能够以三磷酸为能量形成磷酸二酯键了
2楼2009-04-15 18:35:49
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anik

银虫 (正式写手)

同意楼上的观点。Taq酶只是在dNTP结合到模板上后才起到连接的作用。
3楼2009-04-15 21:22:15
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