金虫 (正式写手)
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丝状真菌DNA的提取
试剂: 0.5 M NaOH; 100 mM Tris-HCl(PH 8.0)
步骤:100mg菌丝,加入少许的石英砂,吸取 1000 uL NaOH,于小研钵中细细研磨;离心,12000rpm 2min;取上清 10uL,加入40uL Tris-HCl,混合均匀.从中取0.4-0.8 uL做PCR吧.
注意:该法提取的DNA很粗糙,杂质太多,不适宜精细实验;不能保存过长时间,DNA容易降解(2-5d).
丝状真菌观察法
丝状真菌地鉴定主要根据形态特征，形态特征包括群体形态和个体形态。
1、群体形态 群体形态即菌落的形态。
观察菌落形态时多采用固定的培养基，将固体培养基制成平板，以点植法接种，即用接种针尖沾取少量孢子点植在平板上适当的位置，例如中心，或三角形的三点。然后于25－28℃培养一定时间（如2、4、7、10天）进行观察，观察时可用肉眼或借助放大镜、低倍镜、解剖镜等。
观察的要点一般包括下列几项：
（1） 大小：它反映生长或发育速度，通常测量菌落的直径。
（2） 颜色：包括菌落表面子实体、气生菌丝、菌核的颜色和基内的颜色，还应注意培养基颜色的变化。
（3） 菌落表面的纹饰：如皱纹、辐射沟纹、同心环、整个菌落致密或疏松等。
（4） 菌落的质地：即菌落外观呈毡状、绒毛状、棉絮状、粉粒状、革质状，有无成束状或绳状的气菌丝。
（5） 菌落的高度：菌落扁平或凸起，中心部分凸起或凹陷。气生菌丝的高度。
（6） 菌落的边缘：全缘、锯齿状、树枝状等。
（7） 渗出物：指菌落表面有无液滴、液滴的颜色和数量。
2 、个体形态 个体形态指菌丝的特征，子实体的形态(如孢子囊。子囊壳、子囊、担子果等的形态)，孢子的形态（如孢囊孢子、分生孢子、芽孢子、节孢子、厚垣孢子、卵孢子、接合孢子、担孢子等）。
由于丝状真菌的个体大都较小，必须制成载片标本在显微镜下观察。丝状真菌的制片比较简单，通常将乳酸苯酚（Lactophenol）液一滴，滴于载片上，再用解剖针挑取欲观察的培养物置此液滴内，并且用针尖将其分散开勿使成团，盖好盖片即得载片标本。这种载片可保存数月，如盖片四周涂封漆则可保存数年。
转自：http://bbs.biogo.net/read.php?ti ... F%D7%B4%D5%E6%BE%FA |
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