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花草花草

铁虫 (小有名气)

[求助] 用nano drop2000表征表面修饰DNA的磁珠已有1人参与

我用同样浓度的氨基修饰的DNA加入等量缓冲液里做对照,实验组唯一不同的就是有EDC和NHS活化后的羧基磁珠,我用nano drop 2000测核酸浓度,对照组260nm处的吸收峰竟然还没有实验组的高,并且是小很多倍,求解,为什么,DNA如果和磁珠连接的话,实验组260nm处的吸收峰应该减小,结果。。。不仅没减小,反而大了几倍,是什么干扰了吗?而且,他们在230处都有一个高峰,那又是什么?。。。
      DNA和磁珠耦联的缓冲液我用的是咪唑-盐酸。

用nano drop2000表征表面修饰DNA的磁珠
图片 1.jpg


用nano drop2000表征表面修饰DNA的磁珠-1
图片 2.jpg
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elmanbio

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
230有吸收峰说明有盐残留,洗脱干净才测吧!要不影响很大
3楼2018-10-26 11:54:42
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yubeihong

铁杆木虫 (职业作家)


这个应该考虑磁珠磁分离不够彻底

发自小木虫IOS客户端
2楼2018-10-25 13:33:04
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花草花草

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by yubeihong at 2018-10-25 13:33:04
这个应该考虑磁珠磁分离不够彻底

你好,我是通过磁性分离的,请问怎么才能分离得更彻底呢?我是通过对比有无磁珠时上清DNA浓度的变化来表征的。
4楼2018-10-29 09:22:43
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花草花草

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by elmanbio at 2018-10-26 11:54:42
230有吸收峰说明有盐残留,洗脱干净才测吧!要不影响很大

可是我想测反应过夜后上清的DNA浓度,理论上如果标记上了的话DNA浓度会减小的。请问怎么把盐洗脱干净?230的峰其实有也无所谓,关键是260的峰怎么变得那么高
5楼2018-10-29 09:27:01
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