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花草花草

铁虫 (小有名气)

[求助] 用nano drop2000表征表面修饰DNA的磁珠已有1人参与

我用同样浓度的氨基修饰的DNA加入等量缓冲液里做对照，实验组唯一不同的就是有EDC和NHS活化后的羧基磁珠，我用nano drop 2000测核酸浓度，对照组260nm处的吸收峰竟然还没有实验组的高，并且是小很多倍，求解，为什么，DNA如果和磁珠连接的话，实验组260nm处的吸收峰应该减小，结果。。。不仅没减小，反而大了几倍，是什么干扰了吗？而且，他们在230处都有一个高峰，那又是什么？。。。
      DNA和磁珠耦联的缓冲液我用的是咪唑-盐酸。

用nano drop2000表征表面修饰DNA的磁珠
图片 1.jpg


用nano drop2000表征表面修饰DNA的磁珠-1
图片 2.jpg
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1楼2018-10-24 17:33:39
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yubeihong

铁杆木虫 (职业作家)
这个应该考虑磁珠磁分离不够彻底

发自小木虫IOS客户端
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2楼2018-10-25 13:33:04
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elmanbio

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
230有吸收峰说明有盐残留，洗脱干净才测吧！要不影响很大
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3楼2018-10-26 11:54:42
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花草花草

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by yubeihong at 2018-10-25 13:33:04
这个应该考虑磁珠磁分离不够彻底

你好，我是通过磁性分离的，请问怎么才能分离得更彻底呢？我是通过对比有无磁珠时上清DNA浓度的变化来表征的。
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4楼2018-10-29 09:22:43
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花草花草

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by elmanbio at 2018-10-26 11:54:42
230有吸收峰说明有盐残留，洗脱干净才测吧！要不影响很大

可是我想测反应过夜后上清的DNA浓度，理论上如果标记上了的话DNA浓度会减小的。请问怎么把盐洗脱干净？230的峰其实有也无所谓，关键是260的峰怎么变得那么高
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5楼2018-10-29 09:27:01
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手机用户

铁虫 (初入文坛)
你好，可以加个联系方式讨论一下吗，我也要在羧基磁珠上连DNA。微信：Ensoleile_Iridescent
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6楼2022-05-13 09:15:51
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MXR0921abc

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 手机用户 at 2022-05-13 09:15:51
你好，可以加个联系方式讨论一下吗，我也要在羧基磁珠上连DNA。微信：Ensoleile_Iridescent

请问你连的上嘛

发自小木虫Android客户端
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7楼2024-03-06 11:48:54
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