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海藻糖对siRNA转染的影响已有1人参与
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各位大牛们好，小弟作为新人第一次在小木虫上发帖，希望得到各位大佬们的指点。 之前看了一篇文献说二糖有助于提高siRNA的转染效率，文献中用的是375 mM的糖溶液和培养液以不同比例混合，然后加入细胞中，3h后换不含糖的正常培养液。 我选用的是MCF-7-Luc cells，一开始觉得文献中的糖浓度过高，于是配的等渗海藻糖溶液与培养液混合，稀释到50,100,150 mM，加入到细胞中，3h后换正常的RPMI培养液，直到这一步细胞都一切正常。Sample Text换完正常的培养液后，细胞全部悬浮起来然后没多久就都死了。。。 我第二次实验没加lipoplex，只用了含糖溶液，以285 mM海藻糖溶液为原液和培养液混合稀释到50,100,150 mM，然后是文献中的375 mM海藻糖溶液为原液和培养液混合稀释到75,150,225,300 mM，这次依旧是3h之后换正常培养液时没多久细胞就悬浮起来死了。。。 一开始猜想是糖溶液对细胞造成了影响，可是untreated cells也悬浮死亡了就很奇怪，它两次换液都是正常的培养液啊。细胞是健康的，我今天在传代的培养皿里更换了两次培养液，没有出现上述情况！这就很困扰，细胞是好的，为什么在12孔培养皿中换液untreated cell悬浮起来死了，而在1孔dish中换液没有影响呢？ 实验都是在超净台进行的，枪头也都是一次性的，应该不存在污染的情况。 请教各位大佬！！  |
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