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thunderay

铁杆木虫 (小有名气)

[交流] 请药分的虫友帮忙翻译几句话~30金币奖励~谢谢

Historically, separation of a protein mixture after adsorption to a cation-exchange column is effected by alteration in ionic strength.An alternative separation method using pH induced gradient in the range of 4–7.5was studied.A cation-exchange column with large particle beads containing excessive carboxyls was employed.A pH-gradient across the columnwas generated by a step change at the column entrance using a non-retained buffer system. Consistency and accuracy of pH values in timed intervalswere demonstrated in three different batches. In development of the application, we found a correlation coefficient of >0.9 between the elution pH values of six acidic proteins and their isoelectric points.One case study showed the resolution between a monoclonal antibody and non-retained protein species from a protein A column. Another case study showed the feasibility of separating polyethylene glycol conjugated protein from native protein.

其中红色部分为重点不明白的地方。
例如提到step change,可否解释一下是一种什么样子的方法。
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thunderay

铁杆木虫 (小有名气)

难道可以在进样口不同时间上样然后产生ph梯度?
4楼2009-04-11 16:20:32
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查看全部 5 个回答

pal2004

木虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
thunderay(金币+15,VIP+0):谢谢兄弟~ 4-11 13:08
个人理解:
step change: 阶跃变化?我理解就是用一种pH不大于4溶液(缓冲液)和一种pH不小于7.5的溶液(缓冲液)在不同时间按照不同比例混合,从而得到4-7.5之间的pH梯度。
non-retained buffer system: 非保留缓冲系统,就是缓冲液里所有成分在柱子上不吸附不保留。
non-retained protein:柱子上不保留的蛋白
protein A column:一种亲和层析柱
2楼2009-04-11 11:56:01
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thunderay

铁杆木虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by pal2004 at 2009-4-11 11:56:
个人理解:
step change: 阶跃变化?我理解就是用一种pH不大于4溶液(缓冲液)和一种pH不小于7.5的溶液(缓冲液)在不同时间按照不同比例混合,从而得到4-7.5之间的pH梯度。
non-retained buffer system: 非保 ...

兄弟可否说的更详细一些?
主要是我不明白这种Ph梯度是怎么弄成的,难道是多次上样?
3楼2009-04-11 13:07:47
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jzz8035

木虫 (著名写手)

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
karl2100(金币+1,VIP+0):谢谢回贴! 4-11 23:16
thunderay(金币+15,VIP+0):谢谢虫友,翻译的很好了,呵呵~ 4-12 09:57
一般来说,混合蛋白质被阳离子交换柱吸附后,通过改变洗脱液离子强度来达到分离。在pH4-7.5范围内,进行梯度洗脱分离。使用包含多羧基大孔阳离子交换柱。pH值梯度交联柱是通过逐步改变使用非保留缓冲系统进入柱来产生。通过三个不同的批次,证明pH值在及时时间间隔的一致性和准确性。在开发中得到应用,在6个酸性蛋白洗脱液的pH值和它们的等电点之间,我们发现相关系数大于0.9。一项研究表明,单克隆抗体和非保留蛋白之间使用一种亲和层析柱。另一项研究表明,聚乙二醇结合蛋白从原蛋白分离的可行性。
翻的不好,请见笑.
5楼2009-04-11 16:54:04
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