| 查看: 1527 | 回复: 6 | |||
| 当前主题已经存档。 | |||
penguin3932金虫 (正式写手)
|
[交流]
硅胶柱层析，如何选择合适的洗脱溶剂？如何装柱？上样？
|
||
| 硅胶柱层析，如何选择合适的洗脱溶剂？如何装柱？上样？ |
回复此楼» 猜你喜欢
材料考研调剂
已经有3人回复
-
材料调剂
已经有12人回复
-
英一数一408，总分284，二战真诚求调剂
已经有14人回复
-
085410 一志愿211 22408分数359求调剂
已经有4人回复
-
271求调剂
已经有19人回复
-
385分 生物学（071000）求调剂
已经有3人回复
-
一志愿安徽大学计算机科学与技术学硕，331分求调剂
已经有3人回复
-
318求调剂，计算材料方向
已经有8人回复
-
291求调剂
已经有25人回复
-
一志愿北京科技大学085601材料工程英一数二初试总分335求调剂
已经有6人回复
zw0123456789zw
至尊木虫 (职业作家)
Felix Baumgartner Space Jump
- 应助: 278 (大学生)
- 金币: 21250.4
- 散金: 286
- 红花: 37
- 帖子: 3620
- 在线: 1698.8小时
- 虫号: 313787
- 注册: 2007-02-24
- 专业: 天然药物化学
2楼2009-04-11 13:14:41
leonard187
木虫 (著名写手)
- PhEPI: 3
- 应助: 33 (小学生)
- 金币: 5620.9
- 散金: 6
- 红花: 12
- 帖子: 1268
- 在线: 466.8小时
- 虫号: 549170
- 注册: 2008-04-20
- 性别: GG
- 专业: 天然药物化学
★
clkk216(金币+1,VIP+0):谢谢参与虫友讨论~！ 5-6 10:47
clkk216(金币+1,VIP+0):谢谢参与虫友讨论~！ 5-6 10:47
|
装柱一般用起始溶剂，也就是梯度的最初极性。对于硅胶柱来说，一般是石油醚、氯仿等弱极性溶剂。 装柱可以有湿法或干法，前者比较常用。一般是用初始溶剂将硅胶混悬，慢慢加入玻璃柱中（柱子里预先加入一小片棉花防止硅胶从底部泄漏，如果是带塞板的柱子就不用了），注意不要进气泡。尽量在沉降前全加完，否则会分层。 待沉降完，再上样。 上样一般也分湿法和干法。对于硅胶干法常用一些。就是用一定量硅胶与样品溶液（最好完全溶解，实在不行混悬也可）混合，挥干溶剂之后，就可以加入装好的柱子顶端了。 [ Last edited by leonard187 on 2009-4-11 at 14:13 ] |
3楼2009-04-11 14:08:04
4楼2009-04-11 14:21:56
jiandan626201
金虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1209
- 散金: 46
- 红花: 1
- 帖子: 62
- 在线: 51.9小时
- 虫号: 528844
- 注册: 2008-03-19
- 专业: 有机合成
5楼2009-05-06 10:41:10
6楼2009-05-23 01:24:11
★
karl2100(金币+1,VIP+0):3Q 5-25 20:54
karl2100(金币+1,VIP+0):3Q 5-25 20:54
|
干法装硅胶柱经验 一边装一边两边均匀用力拍打，或者装完后用真空泵抽一下。 我们用干法装柱都是，把硅胶装进去之后，拿洗耳球稍微敲打几下后，拿水泵抽紧，边抽边用洗耳球敲柱，这样可以把柱子装的非常紧凑，尽量排空空气，这样上洗脱剂的时候就不会那么容易断开。装柱子下面的活塞一定要打开。 干法装柱子下面的活塞一定要打开 干法装柱先保证柱子清洗干净，玻璃柱内壁光滑（水洗后不挂珠），柱底安装了砂漏或者以脱脂棉替代，活塞打开保证空气流通。 将经过预先计算、秤量好的硅胶一次性沿漏斗倒入柱内。如果不是预先计算秤量好硅胶，则在装柱时犹豫不决，容易被柱内暴腾的硅胶粉迷惑，不能确认已经装到了多高的柱高度。两次甚至三次、多次补加硅胶容易导致装柱断层。 一次装柱后，在柱下端左右手同时用胶块等物（柔和又有一定硬度的即可）敲打柱子。不断敲打，同时观察硅胶上端表面的变化，保证硅胶面平行下降，直到硅胶面落实不再有气体在硅胶面“冒泡”为止。 样品溶液用一定体积硅胶（硅胶粒度可小于装柱硅胶）拌匀后，凉干。均匀铺盖在柱子上表面（一般2cm左右，也要根据柱高、柱直径来确定），稍微敲打柱壁使上样硅胶踏实。 基本装柱完成了。 注意一定得戴口罩啊 |
7楼2009-05-25 15:53:31
