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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 存档旧帖 » LAMP实验问题求助
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zime

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
10楼: Originally posted by soarrow at 2018-09-06 23:21:39
zime  被你的回复绕晕了。

简单说一下LAMP结果判读的方法吧。
最早的是琼脂糖凝胶电泳，观察是否有梯度条带；同时也有浊度法，就是使用浊度仪检测实时扩增以及离心看管底是否有焦磷酸镁白色沉淀。
后续一方面使 ...

可是不仅是荧光，我连条带都没有，DNA引物啥的我都验证了没有问题，试剂也是刚买的，程序啥的都是文章看的，正常可以呀。不知道哪里出问题，我的照片里那个有问题吗
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11楼2018-09-07 09:38:36
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soarrow

铁杆木虫 (正式写手)

酱油歪楼党
引用回帖:
11楼: Originally posted by zime at 2018-09-07 09:38:36
可是不仅是荧光，我连条带都没有，DNA引物啥的我都验证了没有问题，试剂也是刚买的，程序啥的都是文章看的，正常可以呀。不知道哪里出问题，我的照片里那个有问题吗...

如果反应无结果，可以如下方面找原因。

1. 反应体系是否有效。你的是自配体系，不知道你之前自己的实验有没有成功案例。
如果有，那你做实验时候可以同时做一个阳性反应，以确保反应体系ok
如果没有，那你买商业化的试剂盒，荣研的或者NEB的或者其它厂商，包括国产的，都可以用。

2.引物是否有效。不清楚你说的引物验证什么情况。
如果反应体系ok，DNA模板ok，反应仍然没有结果，那就可能是引物的问题了。
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12楼2018-09-07 11:37:10
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zime

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
12楼: Originally posted by soarrow at 2018-09-07 11:37:10
如果反应无结果，可以如下方面找原因。

1. 反应体系是否有效。你的是自配体系，不知道你之前自己的实验有没有成功案例。
如果有，那你做实验时候可以同时做一个阳性反应，以确保反应体系ok
如果没有，那你买商 ...

我用荣研的试剂盒就会有显色反应，但是自配的就没有反应，这是为什么呢，图片就是用的试剂盒的
LAMP实验问题求助
QQ图片20180912084834.jpg
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13楼2018-09-12 08:48:54
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soarrow

铁杆木虫 (正式写手)

酱油歪楼党
引用回帖:
13楼: Originally posted by zime at 2018-09-12 08:48:54
我用荣研的试剂盒就会有显色反应，但是自配的就没有反应，这是为什么呢，图片就是用的试剂盒的

QQ图片20180912084834.jpg
...

那你先跑个胶，先看看你的自配体系是否为阳性反应。
如果是阳性，那就是你的显色试剂不给力；
如果是阴性，那就是你的整个反应体系不给力。
前者，优化显色体系或者使用别的试剂；
后者，重新开张吧...
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14楼2018-09-13 02:06:55
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赵云开心哦

新虫 (初入文坛)
LAMP实验问题求助-1

发自小木虫Android客户端
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15楼2018-09-23 13:13:10
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赵云开心哦

新虫 (初入文坛)
请问一下这个-2.47可以吗

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16楼2018-09-23 13:13:39
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zime

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
16楼: Originally posted by 赵云开心哦 at 2018-09-23 13:13:39
请问一下这个-2.47可以吗

我也不懂找公司帮忙设的
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17楼2018-09-28 10:40:09
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努力鸭

新虫 (初入文坛)
初次接触Lamp实验，请问您的引物在添加的时候，F3/B3 0.5uL的意思是各加0.5还是总共加0.5uL呢？

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18楼2018-11-07 17:24:27
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TAMPER

新虫 (初入文坛)
求助，紫外下阳性空白都是阳性反应（钙黄绿素，变绿）。结果跑电泳一点条带都没有，跟没加一样。
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19楼2023-08-21 16:37:55
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