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hwqstrong

金虫 (正式写手)

[交流] 关于细菌在氯霉素抗性培养基中生长的问题

借人气问个路。
有一个简单的问题,PET30转化DH5a后,我把此含有PET30的DH5a菌液接种到含有氯霉素的LB培养液里摇菌(氯霉素的浓度是34ug/ml)摇12小时后,菌液变浑浊了,后来我用不含质粒的BL21做了同样的实验,也是一样会长。到底是怎么回事啊?是氯霉素不好使的原因吗?
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zhaocy8903

木虫 (知名作家)

★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):积极交流奖 4-5 18:43
BL21(DE3)pLysS菌株中含有质粒pLysS,具有氯霉素抗性
2楼2009-04-05 18:05:59
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hwqstrong

金虫 (正式写手)

了解
谢谢 楼上的,那再问一下为什么DH5a也能生长?也是因为里面含有抗氯霉素的质粒吗?
3楼2009-04-05 22:38:04
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zhaocy8903

木虫 (知名作家)

帮你搜索了一下

最近在做一个大肠杆菌转化,但无论是Top10还是DH5a在添加20mg/L氯霉素的LB平板上都能生长。先后换过sigma和ameresco的药品结果都一样。大家帮忙分析一下原因。

主要问题不是氯霉素的问题,可能原因有三个:
1 转化时,你是使用电子基因导入仪。还是其他的,转化筛选重组子的假阳性。
2 氯霉素还是硫酸氯霉素,结果天壤之别。
3 能不能弄卡那霉素和氯霉素混合筛选
4楼2009-04-06 10:08:31
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